受体色谱筛选白芥子药材活性成分的方法学研究
中药是我国医药的优势和特色,也是高效创新药物开发的重要源泉。然而,由于中药组成的复杂性和临床用药的灵活性使得其活性成分的筛选成为制约整个新药研发过程的瓶颈。因此,中药等复杂体系中药物活性成分高效筛选方法的建立及应用就成为医药领域永恒的研究热点问题。本论文以中医临床广泛应用的止咳平喘药材白芥子为研究对象,β2-肾上腺素受体色谱为方法,围绕白芥子活性成分得快速筛选展开研究,旨在探讨受体色谱技术筛选中药活性成分的方法学,为中药等复杂体系中药物活性成分的高效筛选提供新思路。全文共分四章,作者的主要贡献如下：1.建立了白芥子药材中有效成分芥子碱的高效液相色谱检测方法；采用正交设计法和响应曲面法研究了药材中芥子碱的最佳提取工艺。结果表明：方法线性范围为0.0155～0.2945mg/mL：精密度测定相对标准偏差为0.42%,重现性测定相对标准偏差为0.61%,平均回收率为95.5%,芥子碱在16小时内稳定性良好,证明该方法可用于白芥子药材中芥子碱的含量测定。白芥子中芥子碱的最佳提取方法为加热回流法,最佳工艺为40倍量65%乙醇60℃加热回流提取5h,为采用β2-肾上腺素受体色谱筛选白芥子活性成分提供了样品制备方法和质量控制方法。2.采用β2-肾上腺素受体色谱对白芥子药材的活性成分进行了筛选,并采用竞争置换法对所得活性成分与β2-肾上腺素受体的相互作用进行了研究。结果发现,白芥子药材中与β2-肾上腺素受体存在特异性的相互作用的活性成分为芥子碱,两者间仅存在一类结合位点,结合常数为1.36×105M-1,结合位点数为1.27×10-6M,证明受体色谱法可用于中药活性成分的快速筛选,为复杂体系中药物活性成分的高效筛选提供了思路。
- 作者：
- 廖予菲
- 学位授予单位：
- 西北大学
- 专业名称：
- 生物工程
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2012年
- 导师姓名：
- 郑晓晖；陈涛
- 中图分类号：
- R284
- 关键词：
- 受体色谱；竞争置换；活性成分；白芥子；β2-肾上腺素受体
- Receptor chromatography；the competitive dispalacement analysis method；Activity screening；Semen Brassicae；β2-adrenoceptor
- 基金项目：
- 国家自然科学