内质网应激及凋亡在糖尿病大鼠心肌纤维化进程中的活性变化
目的:内质网是细胞合成蛋白质的重要场所,然而,高血糖,氧化应激,缺血,钙稳态的紊乱和异常蛋白质的过度表达都可以引起内质网内非折叠蛋白质或错误折叠蛋白质的聚集,通过内质网内的分子伴侣激活非折叠蛋白反应及细胞凋亡即内质网应激.现在,许多研究已经表明,内质网应激介导的心肌细胞凋亡在糖尿病心肌纤维化中可能具有重要的角色.然而,内质网应激以及凋亡在糖尿病心肌纤维化中的具体机制尚未阐明.因此,在此研究中,我们试图说明在大鼠糖尿病成模后致心肌纤维化进程的不同时间点,内质网应激相关蛋白及细胞凋亡相关蛋白的变化趋势,以及明确由内质网应激介导的细胞凋亡在糖尿病心肌纤维化中的作用.
方法:8周龄雄性SD大鼠随机分为2组:对照组和糖尿病组.采用高糖高脂肪饲料喂养联合STZ(30mg/kg,once,ip)制作糖尿病大鼠模型.在成模后1,4,5,7月两组分别处死3只大鼠.处死前进行心脏的超声检查来评估左室收缩功能.HE,Masson和TUNEL染色方法评价心肌病理改变.RT-PCR及蛋白免疫印迹方法评价心肌组织中GRP78,PERK,ATF6,CHOP,caspase12,JNK,Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的基因及蛋白表达水平.
结果:糖尿病组较对照组大鼠左室肥厚、左室收缩功能下降,心肌间质胶原沉积明显,心肌细胞凋亡明显,时间轴上在7月时最明显;内质网应激相关蛋白GRP78,PERK,ATF6 mRNA水平增加,凋亡相关分子CHOP,caspase12,JNKmRNA水平增加,Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的mRNA水平增加;糖尿病组较对照组大鼠PERK的蛋白表达增加,caspase12的蛋白表达增加.同时,糖尿病组GRP78,PERK,ATF6,CHOP,caspase12,JNK mRNA水平在第1个月时表达即明显增加,在4月、5月时相对1月下降,在7月时表达再次增加.
结论:以上实验数据表明糖尿病大鼠能发生心肌纤维化;内质网应激以及凋亡在糖尿病心肌纤维化早期即开始激活;内质网应激介导的凋亡的在糖尿病大鼠模型心肌纤维化进程中起到了作用.
- 作者：
- 杨琼
- 学位授予单位：
- 首都医科大学
- 专业名称：
- 内科学(心血管病)
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2015年
- 导师姓名：
- 吴永全
- 中图分类号：
- R587.202
- 关键词：
- 心肌纤维化；糖尿病；内质网应激；细胞凋亡；病理机制
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