马蹄莲花药培养研究与再生植株AFLP分析
Study on anther culture of Zantedeschia spp. and AFLP analysis of the regeneration plants
以粉红色马蹄莲(Zantedeschia rehmannii 'Pink persuasion')和黄色马蹄莲(Zantedeschia elliottiana 'black magic')为试验材料,对彩色马蹄莲花药培养的愈伤组织诱导影响因素进行了研究,结果:(1)适宜花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期;(2)比较了不同逆境预处理对花药培养的影响,结果显示以4℃低温处理花蕾24小时后, 再以32℃高温对花药培养物处理48小时效果最好;(3)比较了不同的碳源及浓度,以8%蔗糖效果最好;(4)比较了不同激素及浓度的差异,以KT1.0mg/L + 2,4-D1.0mg/L为最好;(5)比较了不同培养基,以B5最合适;(6)供体植株合适生长季节为冬季.在上述研究基础上优化条件,对彩色马蹄莲花药进行培养,进行了小孢子发育的细胞学观察,观察到小孢子起源的多细胞团,并成功诱导出了愈伤组织,粉红色马蹄莲(Z. rehmannii 'Pink persuasion')愈伤组织诱导率为0.2%,黄色马蹄莲(Z. elliottiana 'black magic')愈伤组织诱导率为0.1%.但愈伤组织未能分化成苗,最终褐化死亡. 对白色马蹄莲(Zantedeschia aethiopica)进行花药培养,获得了再生植株,并对再生植株进行了Amplifilied fragment length polymorphism (AFLP) 分析,试验使用CTAB法提取再生植株DNA,优化了 EcoR I和 Mse I的双酶切体系,以及预扩增和选择性扩增的PCR反应体系,建立了AFLP的试验体系,通过银染所得到的DNA指纹样式表明,花药培养得到的再生植株具有DNA条带多态性,显示是由小孢子起源的.??
- 作者：
- 吴青青
- 学位授予单位：
- 云南农业大学
- 专业名称：
- 园林植物与观赏园艺
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2010年
- 导师姓名：
- 郑思乡
- 关键词：
- 马蹄莲；花药培养；愈伤组织诱导；再生植株；AFLP
- Zantedeschia spp；Anther culture；callus induction；plant regeneration；AFLP