云南山羊痘电镜及PCR诊断技术研究
he Research of Electron Microscope and Diagnostic Technology of PCR for Goatpox in Yunnan
山羊痘是由山羊痘病毒引起的以体温升高、全身性丘疹或结节、水疱、内脏病变为特征的一种急性、热性、接触性、高发病率、高死亡率的烈性传染病.世界动物卫生组织( OIE )将其列为A类动物疫病.本研究针对近年来我省部分地区暴发流行山羊痘造成严重损失而缺乏准确、快速诊断技术的实际现状,特进行山羊痘电镜及PCR诊断技术研究,旨在探寻准确、快速、特异性强的山羊痘疫病诊断方法. 本研究对云南省曲靖市发生的山羊痘疫病作了流行病学调查、临床诊断、病理剖解检查,进行鸡胚病毒分离、实验动物接种、本动物接种试验、电镜检测及PCR检测鉴定,并在不同县(区)、不同疫点采集多份病料进行检验. 鸡胚实验从病料中分离到山羊痘病毒.动物实验及本动物回归试验能复制出山羊痘特征性病变.应用电子显微镜技术进行常规负染、超薄切片镜检检测,能观察到大量圆形、卵圆形或似砖形样、有囊膜的典型山羊痘病毒颗粒及核心,病毒颗粒大小约300-350nm.采用PCR技术对病料进行病毒SVF基因扩增,成功检测到组织样品中的山羊痘病毒基因片段.实验所用引物针对山羊痘病毒主要毒力基因SVF基因设计,能满足对临床样品检测的要求,可达到早期诊断的目的,从核酸提取到基因扩增、检测在4-5小时内可完成,具有快速、简便等优点,是快速诊断山羊痘疫病的理想方法.??
- 作者:
- 廖红芬
- 学位授予单位:
- 云南农业大学
- 专业名称:
- 农业推广
- 授予学位:
- 硕士
- 学位年度:
- 2005年
- 导师姓名:
- 张以芳
- 关键词:
- 山羊痘病毒;电子显微镜检测;聚合酶链反应
- Goatpox virus;Electron microscope;PCR diagnosis technique