南疆红枣链格孢毒素污染水平调查与风险评估
红枣是新疆最具有资源优势和发展潜力的特色产业,同时也是支撑南疆地区农业经济发展的重要支柱。近年来,由链格孢属真菌引起的“黑斑病”成为新疆红枣产业最主要病害,其真菌毒素污染给消费者对红枣及其制品的食用带来安全恐慌。因此,掌握红枣中链格孢毒素的种类、含量及污染分布情况,评价其安全性是保障南疆红枣产业持续稳定发展急需解决。本项目研究结合固相萃取技术,建立以QuEChERS为核心的UPLC-MS/MS红枣中链格孢毒素检测方法;分析新疆红枣及其制品中链格孢毒素的污染水平;结合中国人饮食数据,参考链格孢毒素的毒性阈值,开展链格孢毒素的饮食暴露评估、风险描述和风险等级划分。以期为消费者放心食用红枣及其制品提供理论参考,为南疆地区红枣产业稳步健康发展奠定安全基础。为找寻快速、准确的红枣样品中链格孢毒素检测方法,本研究以固态、液态红枣样品为研究对象,探寻固相萃取、QuEChERS为基础的UPLC-MS/MS毒素分析技术。结果表明:采用1%乙酸乙腈振荡提取、4g无水硫酸镁和1g氯化钠净化、体积比为70:29:1的乙腈-甲醇-甲酸溶液复合提取固态红枣样品中链格孢毒素,0.1m M碳酸铵水溶液作为流动相A,纯甲醇作为流动相B,0～4.0min20%A、4.0～5.6min 100%A、5.6～8.0min 20%A进行梯度洗脱,电喷雾离子源（ESI-）多反应监测模式扫描,回收率在74.89%～98.04%范围内,相对标准偏差均小于10%,标准曲线相关系数R2均大于0.99,适用于固态红枣样品中链格孢毒素的检测。为满足液态红枣样品中链格孢毒素的检测要求,在液态红枣样品p H=2.5时,采用HLB LP Extraction固相萃取柱纯化富集,以0.1m M碳酸铵水溶液作为流动相A,纯甲醇作为流动相B,0～4.0min 20%A、4.0～5.6min 100%A、5.6～8.0min 20%A进行梯度洗脱,以电喷雾离子源（ESI-）多反应监测模式扫描,回收率在74.11%～99.83%范围内,相对标准偏差小于10%,标准曲线相关系数R2大于0.99。（2）为掌握南疆红枣链格孢毒素的污染情况,本研究以南疆不同产区、不同品种、不同年份红枣和不同加工方式、不同形态红枣制品为研究对象,采用前期建立的UPLC-MS/MS方法进行测定,分析其链格孢毒素的种类和含量。结果表明:2020年阿克苏地区所产原料骏枣中的链格孢毒素AOH含量最高为53.22μg/kg,2021年喀什地区所产原料灰枣中的链格孢毒素TEA含量最高为10.76μg/kg,2019～2021三年间南疆喀什地区、和田地区、阿克苏地区和巴州地区4个主要红枣产区未经加工的原料骏枣和灰枣中链格孢毒素AME和Te N均未检出。干制红枣产品中Te A检出率最高为96.31%,含量为6.16～9.70μg/kg;油炸红枣产品中ALT含量最高为28.43～399.64μg/kg;糖渍红枣产品中AOH含量为34.76～98.61μg/kg;发酵红枣产品和浸提红枣产品中仅检出链格孢毒素Te A,含量分别为125.31～129.07μg/kg、121.73～132.86μg/kg。（3）为明确红枣中链格孢毒素对人所产生的危害等级,本文基于Toxtree决策树毒性预测平台和T.E.S.T毒性评估软件,结合前期对南疆红枣及红枣制品中链格孢毒素种类与含量的测定结果,开展风险描述、风险等级划分和饮食暴露评估。链格孢毒素Te A和AOH对蛋白质和DNA均具有结合作用,其中Te A的风险等级是Genotoxic careinogens,AOH的风险等级是Cramer classⅢ;成年人（体重以60kg计）链格孢毒素的PDE范围为19.30～25.65μg/d,相当于每日食用3.34～3.71kg被链格孢毒素污染的红枣制品,说明红枣制品中链格孢毒素的饮食暴露风险尚在成年人可接受范围内。
- 作者：
- 鲁玲玲
- 学位授予单位：
- 塔里木大学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2022年
- 导师姓名：
- 张锐利；范盈盈
- 中图分类号：
- TS255.7；O657.63
- 关键词：
- 红枣；链格孢毒素；QuEChERS；UPLC-MS/MS；风险评估
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- 基金项目：
- 国家自然科学基金—新疆联合基金重点项目“新疆红枣链格孢毒素污染发生规律及其调控机理研究”（项目编号:U1703234）课题主持人:张锐利 教授（塔里木大学）%北京化工大学和塔里木大学联合基金项目“新疆红枣链格孢毒素污染与风险评估研究”（项目编号:TDBHLH201705）课题主持人:张锐利 教授（塔里木大学）