‘灰枣’离体再生体系的建立及多倍体诱导研究
枣（Ziziphus jujuba Mill.）原产于我国,有着悠久的栽培历史,种质资源丰富。多倍体具有生长健壮、产量好、果大、植株抗耐性强等一系列优点,进行多倍体的诱导可以为枣属植物优良品种的研究与探索做出贡献。本研究以结果早、耐瘠薄的南疆主栽品种‘灰枣’为试材,进行离体再生体系的建立和完善,在‘灰枣’离体再生体系上进行秋水仙素、氨磺乐灵、甲基胺草磷的多倍体诱变加倍初步研究。主要研究结果如下:1.‘灰枣’离体再生体系的建立‘灰枣’叶片诱导愈伤组织的最佳取材为一年生休眠枝水培芽萌发的叶片,最佳消毒处理为75%无水乙醇30s+0.6%Na Cl O 8 min;叶片接种的最佳取材部位为叶基或切断叶脉的全叶,最差取材部位为叶尖;叶片刻伤方式以横切过叶脉对愈伤组织的诱导效果最佳;叶片接种方向与出愈效果无明显关联。‘灰枣’叶片愈伤组织最佳诱导培养基为:MS+5.0 mg/L TDZ;‘灰枣’愈伤组织最佳增殖培养基为:MS+1.0 mg/L TDZ+0.5 mg/L NAA;‘灰枣’最佳不定芽分化培养基:MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA;不定芽以MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA伸长生长效果最好。‘灰枣’当年生枣头带芽茎段消毒的最佳处理为:75%无水乙醇30 s+2%Na Cl O 20 min;‘灰枣’带芽茎段以MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA为最佳启动培养基;MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA为‘灰枣’最佳继代增殖处理;MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA为‘灰枣’最佳继代伸长处理;‘灰枣’组培苗最佳生根培养基:1/2 MS+0.5 mg/L NAA。2.‘灰枣’离体多倍体体系的初探‘灰枣’离体诱导多倍体时的材料为经过预培养且分化旺盛的愈伤组织。添加氨磺乐灵的最高变异率4.44%,出现在添加氨磺乐灵8.0 mg/L、培养时间为60 d时,此时共检测到12个变异的不定芽,其中5个四倍体,7个混倍体,其中四倍体占83.33%,混倍体占16.67%。添加甲基胺草磷进行诱变时共检测到38个变异不定芽,其中26个四倍体,12个混倍体,当添加甲基胺草磷浓度为20 mg/L处理30 d时得到最高变异率13.33%。通过流式细胞仪对诱变后的不定芽进行倍性鉴定,发现变异的不定芽中同时存在四倍体和混倍体,对比两种新型诱变剂的诱变效果认为甲基胺草磷对‘灰枣’的诱变效果更佳。
- 作者：
- 房立媛
- 学位授予单位：
- 塔里木大学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2023年
- 导师姓名：
- 林敏娟
- 中图分类号：
- S665.1
- 关键词：
- 灰枣；离体再生；植物激素；诱导多倍体
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- 基金项目：
- 新疆生产建设兵团中青年科技创新领军人才项目“枣抗裂品种选育及抗裂基因的挖掘”（项目编号:2018CB032），课题主持人:林敏娟教授（塔里木大学）