抑制HDAC6降低NLRP3炎症小体活性缓解癌症诱导的骨痛
目的:癌症诱发骨痛（CIBP）是由乳腺癌、肺癌等实体瘤转移至骨组织并引起疼痛一种癌性痛。转移至骨组织癌细胞激活脊髓中的炎症反应,从而在慢性疼痛的产生和持续中发挥重要作用。组蛋白去乙酰化酶（HDAC）6在应激反应、细胞器损伤和神经炎症信号传导中发挥重要作用,HDAC6的异常调节失调与周围神经病变和神经性疼痛密切相关。为探究并阐明HDAC6在CIBP中的作用及机制,本研究通过运用HDAC6特异性抑制剂Tubastatin A（TSA）处理CIBP大鼠,进而分析抑制HDAC6的活性对CIBP大鼠痛觉行为的影响及内在机制。方法:动物随机分为假手术组、模型组和TSA给药组。通过将MRMT-1乳腺癌细胞注入SD大鼠胫骨骨髓腔构建CIBP模型。通过骨H＆E染色、胫骨X射线、自发缩足次数、机械痛阈值以及转轮平衡实验对模型进行验证。模型构建成功后,鞘内注射组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA,采用H＆E分析脊髓背角炎症激活状态;采用免疫荧光和免疫印迹检测促炎细胞因子、胶质细胞标记物、NLRP3炎症小体各成分以及NF-κB等蛋白表达水平。IL-1β诱导C6细胞,免疫荧光检测在TSA对NLRP3炎症小体的影响。结果:（1）CIBP大鼠模型的的鉴定:骨组织X射线和H＆E染色显示CIBP大鼠骨结构受损,骨小梁结构破坏;行为学显示疼痛敏感性增加,机械痛阈值降低,运动协调能力受损。（2）鞘内注射TSA显著降低CIBP大鼠的痛觉敏感性并恢复其运动能力。（3）CIBP大鼠脊髓组织HDAC6磷酸化水平上调、鞘内注射TSA降低磷酸化HDAC6表达。（4）CIBP大鼠脊髓中炎症细胞浸润增加且促炎细胞因子TNF-α、IL-1β表达水平上调;抑制HDAC6活性显著下调脊髓炎症反应。（5）CIBP大鼠脊髓星形胶质细胞激活程度增加,表现为星形细胞标志物表达水平上调,抑制HDAC6活性降低星形胶质细胞的活化。（5）CIBP大鼠脊髓NLRP3炎症性小体和NF-κB信号激活,抑制HDAC6活性下调NLRP3、Caspase-1、NF-κB的表达水平并降低HDAC6和NLRP3之间的相互作用。（6）细胞水平验证:抑制HDAC6活性可降低炎症诱导的NLRP3的表达上调。结论:TSA抑制HDAC6活性可通过下调脊髓NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路活性而降低脊髓炎症发挥镇痛作用,从而缓解癌症诱导的骨痛。
- 作者：
- 王招娣
- 学位授予单位：
- 湖北科技学院
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2023年
- 导师姓名：
- 朱海丽；张一兵
- 中图分类号：
- R965
- 关键词：
- 癌症诱导的骨痛；神经炎症；NLRP3炎症小体；HDAC6
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