丹参酮ⅡA环糊精包合物对高血脂斑马鱼的药效研究
目的:首先确定包合物的最佳制备工艺,然后通过将制备好的丹参酮ⅡA-β-环糊精包合物,应用于高血脂斑马鱼身上,对此进行降血脂药效的评价与分析,旨在为与高血脂相关疾病的预防治疗、病发机制的研究以及高通量降血脂药物的筛选与评价提供一些参考和借鉴。方法:1.分别采用饱和水溶液法、冷冻干燥法、超声波法、研磨法制备丹参酮ⅡA-β-环糊精包合物,根据收率情况确定最佳方法。分别从包合时间、温度、质量比进行单因素影响实验,正交试验法优化实验条件,确定包合物的最佳包合条件,通过紫外光谱法、红外光谱法、荧光光谱法对包合物进行表征分析,最后对包合物进行溶解度测定。2.挑选受精后6小时（6 hpf）的健康胚胎,加入不同浓度的丹参酮ⅡA（2μM、4μM、8μM、16μM）和丹参酮ⅡA-β-环糊精包合物（2μM、4μM、8μM、16μM）进行处理研究,药物暴露直至96 hpf。分别于24 hpf、48 hpf、72 hpf和96 hpf时利用生物显微镜观察斑马鱼胚胎的形态发育变化,并以孵化率、生存率和畸形率作为评价指标,对丹参酮ⅡA和丹参酮ⅡA-β-环糊精包合物的毒性进行对比研究。3.建立斑马鱼高血脂实验动物模型,同时将上述制备好的丹参酮ⅡA-β-环糊精包合物应用于高血脂斑马鱼,根据斑马鱼的体长、体宽和体重的变化,四项生化指标TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量变化,评价丹参酮ⅡA-β-环糊精包合物的降血脂疗效。结果:1.饱和水溶液法制备的包合物收率最高,包合时间3 h、包合温度55℃、丹参酮ⅡA与β-环糊精质量比1:4为最佳包合条件。包合物溶解度相较丹参酮ⅡA单药而言,提高了24.5倍。2.浓度2～16μM内的丹参酮ⅡA和包合物几乎不影响斑马鱼胚胎的孵化率和生存率。丹参酮ⅡA组中随着药物浓度升高,会对胚胎的致畸率产生一定的影响,存有潜在的毒性反应,影响胚胎的正常发育。在同一浓度时,包合物比丹参酮ⅡA具有更大的安全性。3.给6 dpf幼鱼连续两周喂食胆固醇添加量5%的高脂饲料可以建成斑马鱼高脂模型。高脂斑马鱼的体重和体宽与对照组相比,体重有显著性增加（P＜0.01）,体宽有极其显著性增加（P＜0.001）。与对照组相比,幼鱼体内的TC、TG、LDL-C水平均极其显著性升高（P＜0.001）,HDL-C水平显著性降低（P＜0.01）;用不同浓度的包合物溶液（2.5μM、6.5μM、10.5μM）暴露处理后,与高血脂幼鱼模型组相比,其体宽和体重有一定的改善。且TC、TG、LDL-C和HDL-C四种指标均有显著性差异,并呈现剂量依赖性。结论:饱和水溶液法制备的丹参酮ⅡA-β-环糊精包合物,水溶性相较丹参酮ⅡA有了很大提高。包合物是相对丹参酮ⅡA而言毒性更低的一种化合物,它对高血脂斑马鱼有一定的降血脂疗效。
- 作者：
- 贾静
- 学位授予单位：
- 湖北科技学院
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2023年
- 导师姓名：
- 单士刚；甘方良
- 中图分类号：
- R285.5
- 关键词：
- 丹参酮ⅡA；丹参酮ⅡA-β-环糊精包合物；斑马鱼；毒性；降血脂
-