滁菊多糖降血糖活性研究及滁菊多糖面条的研制
本文研究了滁菊多糖提取、分离过程及药理分析和功能性面条的研制。首先研究了利用闪提法对滁菊中粗多糖进行提取,采用混料设计结合星点设计优化工艺方案,并对提取工艺优化条件进行验证。进一步研究滁菊多糖纯化工艺,对提取的滁菊多糖类成分采用DEAE-Cellulose-52进行分离,并在试验过程中对脱蛋白及脱色工艺进行分析,获得优化分离工艺条件。药理分析对分离的多糖类成分进行了糖尿病小鼠试验,采用组织结构解剖及病理切片分析研究,并对检测结果进行分析。最后利用滁菊多糖制备功能性面条。试验结果如下:（1）对滁菊多糖提取通过混料设计结合星点设计试验优化条件为:提取配方优化方案为复合酶添加量为0.27g,吐温-80添加量为0.07g,SDS添加量为0.28g,缓冲液溶液质量为94.38g,滁菊质量为5.0g。缓冲液pH为4.0,提取功率为200W,提取时间为12min,提取温度为58.50℃。该优化条件滁菊多糖提取率可达到18.343%,且试验值和预测值之间偏差率为1.665%。（2）制备滁菊粗多糖过程中分别考察了 Sevage法和TCA法,通过两种方法的对比,Sevage法虽然脱蛋白率较TCA法低,但多糖保留率及脱蛋白后其多糖还原力高于TCA法,因此综合分析采用Sevage法脱蛋白。滁菊粗多糖采用DEAE-Cellulose-52离子交换层析柱分离,最初为明确所需洗脱浓度的位置,采用NaCl梯度溶液依次洗脱,在0.2mol/L的NaCl洗脱液中洗脱出D1多糖类物质,在0.3mol/L的NaCl洗脱液中洗脱出D2多糖类物质,在0.5mol/L的NaCl洗脱液中洗脱出D3多糖类物质。采用该方法洗脱效果明显,且洗脱物质较为集中,可以成为洗脱分离滁菊多糖的方法。对分离后的滁菊多糖进行抗氧化活性研究,分别从滁菊多糖清除DPPH自由基活性、清除羟基自由基活性、清除超氧阴离子自由基活性、滁菊多糖还原力测定四个方面进行了考察,发现通过DEAE-Cellulose-52分离的3种滁菊多糖类物质,均具有抗氧化活性,抗氧化活性均介于VC与VE之间,且抗氧化活性D2>D1>D3。（3）分析了滁菊多糖对糖尿病小鼠TC、TG及HDL和LDL指标的影响及滁菊多糖对血清及肝脏中SOD、GSH-Px作用和对MDA清除作用的研究,结果显示3种多糖类成分在血液中均具有提高SOD、GSH-Px作用,并能够清除MDA。同时进行了滁菊多糖对小鼠胰岛素水平影响的分析测定,通过测定血清胰岛素水平,及胰岛素抵抗指数Homa-IR分析,确定了该试验设计中模型建立成功,结果显示3种滁菊多糖成分均具有增强胰岛素β细胞功能的作用。小鼠中胸腺和脾脏的比值关系可以看出滁菊多糖对糖尿病小鼠免疫器官的影响,滁菊多糖对小鼠免疫功能方面呈现逐渐提高趋势,高剂量组与阳性对照组之间无显著性差异（P>0.05）,结果表明滁菊多糖可以提高糖尿病小鼠的免疫功能。对小鼠的组织结构解剖结合病理切片分析,可知3种滁菊多糖成分均对肝脏有一定保护性作用,同时对肾脏及胰腺也具有较好的保护作用。（4）对制备滁菊多糖面条的条件进行了研究。设计4因素3水平因素正交试验,以感官评价为指标,对制备滁菊多糖面条的配方进行了条件优化,并对优化条件进行了极差分析,确定了滁菊多糖面条制备的优化条件为:采用25.00g高精粉为基料,滁菊多糖添加量为1.50g,绿豆粉添加量为10.00g,鹰豆粉添加量为7.50g,苦荞粉添加量为2.50g,添加1g食盐和3%黄原胶为制备滁菊多糖面条的优化配方。优化配方制备的面团及面条进行了质构分析,从面条的硬度、黏附性、内聚性、弹性和咀嚼性等指标进行评价,并对其在面条中的特性进行了研究,最后确定制备滁菊多糖面条的优化条件。
- 作者：
- 魏敏
- 学位授予单位：
- 安徽科技学院
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2019年
- 导师姓名：
- 杜传来；杨剑婷；张存正
- 中图分类号：
- TS213.24
- 关键词：
- 滁菊多糖；Ⅱ型糖尿病；小鼠模型；滁菊多糖分离；抗氧化；滁菊多糖面条
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- 基金项目：
- 安徽省教育厅高校自然科学研究项目（项目编号:KJ2017A516）