AMD3100缓解大鼠周围神经损伤引起的神经病理性疼痛与增加周围神经中性粒细胞来源β内啡肽有关
背景：神经病理性疼痛是一种常见的慢性疼痛。目前神经病理性疼痛的治疗效果不佳。近年来，许多研究表明AMD3100对多种病理性疼痛均具有治疗作用。然而，其潜在机制仍不清楚。本研究拟了解早期重复注射不同剂量AMD3100对腰五脊神经结扎(Spinal nerve ligation，SNL)大鼠神经病理性疼痛的缓解作用及其作用机制，为神经病理性疼痛的治疗提供理论依据。 材料和方法：健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，体重约250～300g，6～8周龄，随机分为四组：sham组，SNL＋saline组，SNL＋AMD3100(2㎎／㎏)组和SNL＋AMD3100(5㎎／㎏)组。SNL组结扎腰五脊神经，sham组暴露神经但不结扎。SNL＋saline组于手术后1、2、3天连续腹腔注射1ml生理盐水。 SNL＋AMD3100(2㎎／㎏)组于手术后1、2、3天连续腹腔注射新鲜配制AMD3100 2㎎／㎏(配制于1ml生理盐水)。SNL＋AMD3100(5㎎／㎏)组于手术后1、2、3天连续腹腔注射AMD3100 5㎎／㎏(配制于1ml生理盐水)。于SNL之前，末次注射后4小时、SNL后7天、14天和21天，测试机械疼痛阈值(Paw withdrawal threshold，PWT)和热疼痛潜伏期(Paw withdrawal latency, PWL)，并进行组间比较。最后一次AMD3100注射后4小时，七氟醚深麻醉下处死大鼠，取大鼠心脏血进行流式细胞检测，标记外周血CD45阳性白细胞和含β内啡肽(β-endorphin，END)的中性粒细胞(Polymorphonuclear cells， PMN)并分析。SNL后7天，大鼠深麻醉下进行心脏灌注，取结扎侧腰五脊神经近端进行免疫荧光学标记含END的PMN并进行细胞学计数。采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)检测大鼠结扎侧脊髓背角肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素1β(Interleukin-1β， IL-1β)和白细胞介素10(Interleukin-10，IL-10)的含量。另取成年雄性SD大鼠腰五SNL后，随机分为四组：saline组，AMD3100＋saline组，saline＋NLXM组和AMD3100＋NLXM组(纳洛酮甲碘化物：Naloxone methiodide，NLXM)。 AMD3100＋saline组手术后1、2、3天连续腹腔注射AMD3100 5㎎／㎏(配制于1ml生理盐水)，并于每次注射后在结扎神经局部即刻注射180μL生理盐水；saline＋NLXM组手术后1、2、3天连续腹腔注射1ml生理盐水，并于每次注射后在结扎神经局部即刻注射新鲜配制NLXM(30 μg，配制于180μL生理盐水)；AMD3100＋NLXM组手术后1、2、3天连续腹腔注射AMD3100 5㎎／㎏(配制于1ml生理盐水)，并于每次注射后在结扎神经局部即刻注射NLXM(30 μg，配制于180μL生理盐水)。saline组手术后1、2、3天连续腹腔注射1ml生理盐水，并于每次注射后在结扎神经局部即刻注射180μL生理盐水。于SNL后7天，测试PWT和PWL，并进行组间比较。 结果：与SNL＋saline组相比，2㎎／㎏和5㎎／㎏AMD3100显著增加大鼠PWT和PWL(P0.05，n=6)。SNL＋AMD3100(5㎎／㎏)组显著增强和延长了其抗促炎因子的作用，其作用超过2周。局部注射NLXM显著逆转SNL后7天AMD3100诱导的镇痛作用(P
- 作者：
- 谢芳
- 学位授予单位：
- 首都医科大学
- 专业名称：
- 临床医学博士专业学位
- 授予学位：
- 博士
- 学位年度：
- 2016年
- 导师姓名：
- 岳云