长花烟抗野火病候选基因功能探究
近年来烟草野火病已成为黑龙江省烟草行业的主要病害之一,充分利用抗源材料培育抗性烟草品种是应对该病害的有效途径。虽然现有抗病烟草材料中抗病基因的性质及抗病机制尚不明了,但在番茄中Pto基因通过ETI（Effector-triggered immunity）路径对抗该病害的机制已早有报道。长花烟（Nicotiana alata Link et Otto）是烟草野火病0号小种的抗源材料,本文锚定ETI路径选择了一源自转录组分析中的候选基因NL-HERK,通过过表达和RNAi策略检验其功能,为长花烟中ETI路径阐释提供研究基础。本研究构建长花烟NL-HERK过表达载体pROK II-NL-HERK及番茄Po基因过表达载体pROK II-Topto。以感病烟草LJ0520为受体材料,利用农杆菌介导法进行遗传转化,获得转长花烟NL-HERK的烟草株共24株;以感病烟草LJ911为受体材料,利用农杆菌介导法进行遗传转化,获得转番茄Pto的烟草共18株。采用针刺法对上述转基因烟草和野生型烟草进行病理试验并进行分子鉴定,结果发现,转基因烟草对烟草野火病并未产生抗性。为进一步验证NL-HERK的功能,构建其RNAi表达载体RNAi-NL-HERK,利用农杆菌介导法转化长花烟,获得共24棵转化株,病理试验发现部分转化株出现感病现象。基于本文工作可得出以下结论:一、感病烟草中ETI抗病路径存在缺陷,但缺陷并不在Pto类基因本身;二、长花烟中存在ETI抗病路径,NL-HERK基因参与其中。
- 作者：
- 王莲萍
- 学位授予单位：
- 牡丹江师范学院
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2019年
- 导师姓名：
- 任如意
- 中图分类号：
- S435.72
- 关键词：
- 烟草野火病；候选基因；遗传转化；分子鉴定
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