姜黄素对血糖波动诱导RPE细胞损伤的保护效应研究
研究背景:研究表明糖尿病及其并发症的发生与发展不仅与血糖含量升高有关,也与体内血糖水平的波动有密切联系。糖尿病患者血糖值的不稳定状态对各组织造成的损伤已逐渐引起了人们的重视,但是对波动性高糖加重糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的相关研究甚少。研究目的:研究姜黄素(Curcumin,Cur)对波动高糖条件下视网膜色素上皮细胞(Retinal pigment epithelial cell,RPE)的保护作用,为DR的防治提供理论依据。研究方法:ARPE-19细胞培养至对数期,将处于对数期的细胞分成正常组(Normal glucose,NG)、波动高渗组(Osmotic control,OC)、高糖组(High glucose,HG)、波动高糖组(Intermittent high glucose,IHG)、血糖波动+低浓度给药组(10μg/ml姜黄素)、血糖波动+中浓度给药组(20μg/ml姜黄素)、血糖波动+高浓度给药组(40μg/ml姜黄素)。细胞分组培养3天后于倒置光学显微镜下观察各组细胞形态。CCK-8法评估各组细胞活力。免疫荧光法检测各组细胞内ROS水平。ELISA试剂盒检测各组TNF-α、IL-1β含量。研究结果:1.正常组(NG)细胞形态呈长梭形,形态清晰,细胞接连紧密,成片生长。波动高渗组(OC)中部分细胞呈卵圆形,但大部分细胞形态完整,与正常组相同。高糖组(HG)及波动组(IHG)中只有少数细胞呈正常的长梭形,且波动组中大部分细胞形态不完整。随着姜黄素含量的增加,细胞逐渐趋于正常,当达到40μg/m L时细胞大部分呈梭形,形态完整,提示此组细胞在波动高糖条件下的损伤最小。2.NG、HG、IHG三组细胞活力依次降低(P<0.05),OC组与NG组无显著性差异(P>0.05),给药组随着姜黄素浓度增加细胞活力增加,较IGH组显著增加(P>0.05)。3.NG、HG、IHG三组细胞内ROS水平依次升高(P<0.05),OC组与NG组无显著性差异(P>0.05),给药组ROS水平随药物浓度增加而降低(P>0.05)4.NG、HG、IHG三组细胞上清液TNF-α、IL-1β浓度依次升高(P<0.05),OC组与NG组无显著性差异(P>0.05)。给药组TNF-α、IL-1β浓度随姜黄素浓度增加而降低(P>0.05)。研究结论:波动高糖可使ARPE-19活力下降,氧化应激水平提高,TNF-α、IL-1β等炎性因子过表达。波动高糖造成的细胞损害与渗透压的变化无关。姜黄素可有效抑制波动高糖条件下的ARPE-19受到的损害。
- 作者:
- 李豪
- 学位授予单位:
- 湖北科技学院
- 授予学位:
- 硕士
- 学位年度:
- 2020年
- 导师姓名:
- 李岱;吕旭东
- 中图分类号:
- R285.5
- 关键词:
- 糖尿病性视网膜病变;波动高糖;姜黄素;视网膜色素上皮细胞
-