山楂叶总黄酮对高血脂的调节作用
Regulatory Effect of Hawthorn Leaves Flavonoids on Hyperlipidemia
目的:探讨山楂叶总黄酮对高脂血症大鼠血脂代谢以及油酸诱导HepG2细胞脂质蓄积的影响.方法:1、取48只SD雄性大鼠,随机分为6组,每组8只,依次为空白组、模型组、阳性对照组(辛伐他汀对照组)、山楂叶总黄酮低、中、高剂量组.空白组给予基础饲料,其余各组均给予高脂饲料喂养8周建立高脂血症大鼠模型.造模同时给予药物干预,阳性对照组以辛伐他汀灌胃给药,剂量为4 mg/kg,山楂叶总黄酮低、中、高剂量组以山楂叶总黄酮灌胃给药,剂量分别为100 mg/kg、200mg/kg、400 mg/kg,空白组和模型组以等量生理盐水灌胃,每天1次,连续给药8周,每周称取大鼠体重.给药8周后,腹主动脉取血,采用ELISA试剂盒检测血浆中TG、TC、HDL-C、LDL-C的含量;分离肝脏组织,称量肝脏湿质量,计算肝脏指数;HE染色观察肝脏组织病理学变化,油红O染色观察肝脏组织脂质聚集情况;Western blot法检测肝脏组织相关蛋白表达情况.2、以油酸诱导人肝癌细胞株HepG2细胞24 h建立细胞脂肪变性模型,观察不同浓度的山楂叶总黄酮对油酸诱导的HepG2细胞内脂质蓄积的影响,实验分为空白组、模型组、山楂叶总黄酮低(25 mg/L)、中(50 mg/L)、高(100 mg/L)剂量组.药物作用24 h后,ELISA试剂盒测定细胞内甘油三酯(TG)含量,油红O染色观察细胞内脂滴沉积情况,Western blot法检测细胞内相关蛋白表达情况.结果:1、所有的大鼠体重均有增长,模型组大鼠体重增长幅度最大,给药组体重增长幅度较模型组缓慢,但均比空白组增长幅度大.2、与空白组比较,模型组大鼠肝脏指数、血浆中TG、TC、LDL-C含量明显升高(p<0.01),肝细胞脂滴增加,脂质沉积明显,肝脏脂肪变性程度较为严重,肝脏组织LKB1、p-LKB1、AMPK、p-AMPK表达减少(p<0.05或p<0.01),ACC、p-ACC、HMGCR表达增加(p<0.05或p<0.01),结果提示成功建立高脂血症大鼠模型.3、与模型组比较,辛伐他汀对照组和HLF给药各组大鼠肝脏指数、血浆中TG、TC及LDL-C含量降低(p<0.05或p<0.01),肝细胞脂滴减少,肝细胞内脂质沉积和肝脏脂肪变性程度明显减轻,给药各组LKB1、AMPK、ACC蛋白表达无明显差异,p-ACC、HMGCR蛋白表达明显降低(p<0.05或p<0.01),p-LKB1、p-AMPK蛋白表达明显升高(p<0.05或p<0.01).4、与空白组比较,模型组细胞内可见大量红色脂滴,细胞内的TG含量显著增加(p<0.01),AMPK、p-AMPK、LKB1、p-LKB1蛋白表达显著性下调(p<0.01),ACC、p-ACC、HMGCR蛋白表达显著性上调(p<0.01),提示HepG2细胞脂肪变性模型建立成功.5、与模型组比较,山楂叶总黄酮各组细胞内红色脂滴明显减少,HLF给药各组均可以降低HepG2细胞内TG含量,并呈现一定的浓度依赖性,其中HLF中、高剂量组差异具有统计学意义(p<0.05或p<0.01),HLF给药各组细胞AMPK、ACC、LKB1蛋白表达无显著性差异;p-AMPK蛋白表达显著性上调(p<0.05或p<0.01),p-ACC蛋白表达均显著性下调(p<0.05或p<0.01),HLF中、高剂量组p-LKB1蛋白表达显著性上调(p<0.01),HLF高剂量组HMGCR蛋白表达显著性下调(p<0.05).结论:山楂叶总黄酮可降低高脂饲料引起的高脂血症大鼠血脂代谢,也可影响油酸诱导的HepG2细胞脂质蓄积,其机制可能与诱导体内p-LKB1、p-AMPK和抑制p-ACC、HMGCR的蛋白表达有关.
- 作者：
- 刁婷婷
- 学位授予单位：
- 湖北科技学院
- 专业名称：
- 药学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2019年
- 导师姓名：
- 闵清；夏松柏
- 中图分类号：
- R285.5
- 关键词：
- 山楂叶总黄酮；高脂血症；大鼠；人肝癌细胞株
- Hawthorn Leaves Flavonoids; Hyperlipemia; rat; HepG2 cells;