安徽地区禽源金黄色葡萄球菌耐药性分析和分子分型
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是葡萄球菌属的代表菌,简称金葡菌,是目前全球范围内公认的引起人类感染性疾病的主要病原微生物之一.临床上常用抗生素进行治疗,然而随着抗生素的滥用,在人类和动物上出现耐药金葡菌的菌株现象越来越多.随着耐药情况日益加重,多重耐药现象也越来越普遍,从而对抗生素用于防治金葡菌感染的疾病产生了巨大的影响.所以研究安徽地区禽源金葡菌耐药性和流行病学特征,一方面对临床合理用药具有指导意义,另一方面通过了解其流行趋势和规律,进一步降低和控制金葡菌的感染.本研究主要采集安徽部分地区病禽肝脏组织作为样品,采用革兰氏染色、镜检,选择培养基分离,致病性验证试验以及PCR鉴定,进行金葡菌的分离和鉴定.再通过药敏试验筛选出多重耐药金葡菌.结果显示,共筛选出103株多重耐药金葡菌,其中,β-内酰胺类最多占19%,依次是氨基糖苷类17%,利福平15%,大环内酯类14%,磷霉素11%,硫胺类10%,酰胺醇类9%,四环素类最少只有5%.菌株的耐药情况集中在四重耐药(21/103)、五重耐药(43/103)和六重耐药(22/103)耐药.耐五重药的最多(41.7%),主要集中在耐β-内酰胺类(31/43)、大环内酯类(27/43)、氨基糖苷类(29/43).其次是耐六重药,主要是耐β-内酰胺类(19/22)、氨基糖苷类(19/22)和利福平(19/22);耐四重药,主要是耐β-内酰胺类(17/21)、磺胺类(17/21)和氨基糖苷类(15/21).耐药性检测是针对103株多重耐药金葡菌进行的,采用PCR技术得到目的片段,经DNA凝胶电泳技术呈现条带的有无及大小.检出率由高到低分别为mecA、aac(6')/aph(2")、ermC、ermA和femA,与耐药表型基本一致.结果显示了金葡菌耐药的严重性,而且呈多样性,氨基糖苷类、β-内酰胺类和大环内酯类抗生素的耐药基因携带率较高.使用ERIC-PCR分型方法,针对103株多重耐药金葡菌进行分型.通过凝胶电泳记录下扩增及电泳条带,用电泳图像分析软件(Gel Image System,Version 4.00)自动生成矩阵图,采用非加权对数算术平均法(UPGMA),利用NTSYS-pc 2.10e软件构建聚类树状图.对于安徽省,同一地区不同禽源,分离菌株间存在一样的基因型,也存在不一样基因型;同时,不同地区相同禽源,分离菌株存在一样的基因型,也存在不一样基因型;而不同地区,分离株的基因型也有属于同一种基因型的现象.同时也呈现了个别遗传间距较远的、菌株之间亲缘关系差距较大的.综上所述,本研究进行耐药性分析针对安徽地区禽源金葡菌,以及流行病特征研究,明确了安徽地区金葡菌分离株的耐药状况,初步了解了金葡菌的流行趋势,为指导安徽地区临床用药的合理性提供理论依据,也为之后探索该菌流行势有一定基础的奠定.
- 作者：
- 刘茜
- 学位授予单位：
- 安徽农业大学
- 专业名称：
- 基础兽医学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2018年
- 导师姓名：
- 周杰
- 中图分类号：
- S852.61
- 关键词：
- 金黄色葡萄球菌；多重耐药；耐药基因；ERIC-PCR分型
- Staphylococcus aureus； multidrug resistance； drug resistance genes； ERIC-PCR typy