和田羊与策勒黑羊血液中Mel变化规律和卵巢子宫MTRN1A的表达研究
Study the Variation Regularity of Mel and MTRN1A Expression of Ovary Uterus in Blood of Hetan Sheep and Qira Black Sheep
新疆和田地区的策勒黑羊与和田羊是当地主要羊种,前者具有性成熟早、全年发情和密集产羔的特点,后者为半粗毛羊,羊毛品质好,但繁殖率低,为季节性发情动物.有研究报道,褪黑激素(melatonin,Mel)在一定程度上能对动物繁殖性状产生影响,本试验旨在通过对不同品种绵羊褪黑激素与褪黑激素受体表达的时空互作关系的研究,探讨Mel对和田羊与策勒黑羊繁育机能的影响.本次试验采集年周期下春分日、夏至日、秋分日和冬至日四个节气当日早晨、中午、傍晚和凌晨四个时间点的血液,并通过ELISA法测定每个时间点血液中Mel浓度,同时采集和田羊与策勒黑羊的卵巢和子宫组织并提取RNA,采用半定量RT-PCR技术和免疫组化方法,对年周期下和田羊与策勒黑羊Mel分泌、褪黑激素受体(MTRN1A)基因在mRNA水平与蛋白水平的表达情况进行研究.结果表明:日周期下,策勒黑羊血液中Mel浓度在春分当日中午最低,显著低于早晨、傍晚和凌晨(P<0.05),傍晚最高,但差异不显著(P>0.05);和田羊最高值与最低值出现时间同策勒黑羊,但四个时间点两两之间的差异并不显著(P>0.05).夏至日两种绵羊均是傍晚最高、早晨最低,但差异并不显著(P>0.05);秋分日策勒黑羊凌晨浓度显著高于其余时间(P<0.05),早晨、中午差异不显著(P>0.05),但二者显著低于傍晚(P<0.05);和田羊总体变化与策勒黑羊相同,但四个时间点之间并无显著差异(P>0.05).冬至日两种绵羊傍晚含量显著高于其它时间点(P<0.05),早晨、凌晨之间差异不显著(P>0.05),但均显著高于中午(P<0.05).年周期下,策勒黑羊春分Mel浓度显著高于夏至与秋分(P<0.05),秋分显著低于冬至(P<0.05),夏至显著低于秋分、冬至(P<0.05);同时,春分日卵巢中MTRN1A在mRNA和蛋白水平上,表达量均最高,夏至则最低,显著低于冬至和秋分(P<0.05),同时显著低于春分(P<0.05),受体表达量则是秋分最低,显著低于冬至(P<0.05),但与夏至日差异不显著(P>0.05).子宫中MTRN1A在基因与蛋白均在夏至日表达量最低,且与秋分日并无显著差异(P>0.05),但显著低于春分(P<0.05),三个季节同时显著低于冬至(P<0.05)蛋白表达量.而和田羊则是血液Mel含量冬至显著高于夏至与秋分(P<0.05),与春风差异并不显著(P>0.05),夏至最低,与秋分差异并不显著(P>0.05),但二者显著低于春分(P<0.05);卵巢中MTRN1A基因表达量在冬至最高,显著高于春分与夏至(P<0.05),与秋分差异并不显著(P>0.05),夏至日最低,显著低于春分(P<0.05)MTRN1A蛋白的表达量夏至最低,与秋分差异不显著(P>0.05),但二者显著低于春分(P<0.05),同时,三者显著低于冬至(P<0.05);和田羊子宫内MTRN1A的基因与受体表达规律均与策勒黑羊相同.研究表明,两种绵羊血液中Mel含量均存在明显的昼夜节律和季节性节律,但策勒黑羊血液中Mel总体含量高于和田羊,且昼夜变化较大;同样,两种绵羊卵巢和子宫组织中MTRN1A基因与受体的表达均呈现先降后升的季节性变化规律,春分日策勒黑羊卵巢中基因表达量显著高于和田羊,秋分则相反,其他季节无显著差异;同时子宫中的mRNA表达也无显著不同.同样,策勒黑羊春分日卵巢中MTRN1A受体的表达显著高于和田羊,冬至日则相反,其余季节并无显著差异;春分日和田羊子宫中受体的表达显著高于策勒黑羊,其余季节则无显著差异.说明年周期下血液中Mel浓度、MTRN1A基因与蛋白表达量的节律性变化规律,因品种、组织不同而异.本次试验通过对策勒黑羊与和田羊血液中Mel含量变化、子宫卵巢中MTRN1A在m RNA水平和蛋白水平表达的动态规律研究,旨在为研究Mel对不同品种绵羊繁育机能的影响提供一定参考,对实际生产中,规模化养殖场的饲养管理提供一定的科学依据.
- 作者：
- 蒋维东
- 学位授予单位：
- 塔里木大学
- 专业名称：
- 兽医(专业学位)
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2017年
- 导师姓名：
- 石长青
- 中图分类号：
- S826
- 关键词：
- 策勒黑羊；和田羊；Mel；MTRN1A；免疫组化；节律性
- Qira black sheep; Hetian sheep; Mel; MTRN1A; Immunohistochemical; Rhythmic;