和田红葡萄籽、慕萨莱思酒中原花青素的纯化及其结构鉴定
Purification and Identification of the Procyanidins from the Red Grape Seed of Hetian and the Wine of Musalais
和田红葡萄是新疆和田地区主产的葡萄品种,由于地理生境特殊,和田红葡萄可能存在较特殊的营养成分,原花青素便是代表性的一类.葡萄籽中原花青素的含量及种类非常丰富,其生物活性非常广泛,主要表现在抗氧化,清除自由基,抗肿瘤,预防心血管疾病等方面.慕萨莱思酒为新疆的一种特色酒饮料,其原料来自于和田红葡萄,慕萨莱思酒中原花青素也可能存在较特殊的成分.原花青素是慕萨莱思酒中重要的功能因子,因此本文研究了和田红葡萄籽中原花青素的最佳提取工艺,利用树脂纯化法对原花青素进行精制,并对树脂纯化原花青素的条件进行了优化,将树脂精制后的葡萄籽原花青素及慕萨莱思酒原花青素进一步用Sephadex LH-20进行纯化,依次采用50%甲醇,纯甲醇,70%丙酮进行洗脱,以管数为横坐标,吸光值为纵坐标,作洗脱曲线,根据洗脱曲线结果合并组分,将待测组分利用LC-MS进行分析.结果如下:(1)和田红葡萄籽中原花青素提取的单因素试验结果为:提取溶剂为60%乙醇,提取温度为50℃,提取时间为90 min,料液比(mg/mL)为1:20,pH值为4;响应面分析得到的最佳条件为:乙醇浓度62.01%,时间为86.05 min,温度为53.65℃,pH值为3.68,在此条件下,得到的最大提取率为24.65%,进行验证性试验得到的提取率为24.02%.(2)通过使用AB-8、NKA、ADS-17、ADS-21 4种大孔树脂对原花青素进行筛选,最终确定AB-8作为纯化原花青素的树脂,AB-8树脂动态吸附及动态洗脱的最佳条件为:上样的流速为1.5BV/h,上样液的浓度为15 mg/mL,洗脱剂为60%的乙醇,洗脱液流速为2 BV/h,洗脱液pH值为6,洗脱体积为4 BV.根据以上树脂的最优条件,纯化后得到的纯度为90.07%.(3)利用HPLC及LC-MS分析经纯化后的葡萄籽原花青素和慕萨莱思酒中原花青素可知,葡萄籽中含有的原花青素为原花青素B1,原花青素B2,(+)-儿茶素,(-)-表儿茶素-3'-O-没食子酸,没食子酸及一种二聚体及低聚体,慕萨莱思酒中含有低聚体原花青素混合物.SephadexLH-20进一步纯化的结果表明,纯化后葡萄籽中含有的原花青素的种类较多,并且低聚体的含量高于慕萨莱思酒中低聚体的含量.
- 作者：
- 田木星
- 学位授予单位：
- 塔里木大学
- 专业名称：
- 生物化学与分子生物学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2017年
- 导师姓名：
- 侯旭杰；王伟华
- 中图分类号：
- TS262
- 关键词：
- 和田红葡萄；慕萨莱思酒；原花青素；纯化；鉴定
- Red grape of Hetian; Musalais; Procyanidin; separation; purfication; identification;