蓝光对红曲霉产Ankaflavin、Monascin的影响及其精制条件研究
Effect of Blue Light on the Production of Ankaflavin and Monascin in Monascus and Purification of the Two Pigments
红曲色素作为天然色素,一直被认为是一种安全性较高的食用色素.而其中的黄色素红曲素(Monascin)和红曲黄素(Ankaflavin)近年来被证明有着抗癌、抑制肿瘤细胞的作用而广泛受到关注.本论文利用液相色谱-质谱联用技术确定了红曲霉M9液态发酵产物中含有红曲黄素和红曲素.研究了以大米粉为培养基,液态摇瓶培养过程中红曲霉M9的生物量与色素生成的过程曲线,发现在6-9 d红曲霉生物量和色素含量稳定,可用此时的发酵液进行色素的提取.以发酵6d的M9菌丝体为原料,通过Box-Behnken实验设计,采用响应面法优化了黄色素提取工艺.确定了最佳的黄色素提取条件为:正己烷提取,液料比90:1,超声功率100 W,提取三次,提取时间为15 min.研究了 M9中红曲素、红斑红曲素(Rubropunctatin)、红曲黄素和红曲玉红素(Monascorubrin)4种色素在不同正己烷-甲醇-水体系中的分配比例,发现红曲素和红斑红曲素、红曲黄素和红曲玉红素在上下相中的K值均相近,而这两类色素彼此在上下相中相差较大.确定了正己烷:甲醇:水=10:5.5:4.5为分离红曲素的最优条件,正己烷:甲醇:水=10:7:3为红曲黄素的最优分离条件.研究了采用AB-8大孔吸附树脂和硅胶两种填料对M9色素粗提物的预分离效果,确定了柱分离洗脱条件:AB-8大孔吸附树脂为70%以上乙醇洗脱;硅胶柱的洗脱条件为乙酸乙酯:正己烷(4:1,V/V)洗脱,选定了硅胶色谱对M9黄色素进行预分离,然后利用硅胶柱色谱和高速逆流色谱相结合的方法,分离得到高纯度的红曲素和红曲黄素,色谱峰面积比例占99%以上.实验证明了在90±5 lux蓝光照射条件下,可以促进红曲霉M9在大米粉发酵培养基中红曲素和红曲黄素的含量得到提高,同时使菌体中已有的色素含量降低,但最终对色素的促进作用大于色素的降解作用.
- 作者:
- 薛春茂
- 学位授予单位:
- 天津科技大学
- 专业名称:
- 食品科学
- 授予学位:
- 硕士
- 学位年度:
- 2016年
- 导师姓名:
- 王昌禄
- 中图分类号:
- TQ925.7
- 关键词:
- 红曲黄色素;高速逆流色谱;液态发酵;蓝光
- Monascus yellow pigment; high speed counter-current chromatography; liquid fermentation; blue light;