冬虫夏草核苷类组分及多糖对病原菌的抗性的研究
Study on Nucleoside Components and Polysaccharides of Cordyceps Sinensis on Pathogens Resistance
冬虫夏草具有抗菌活性,含有与抗菌活性相关的成分,可能为医药领域新药物的开发提供思路.为探索抗菌成分及其抗菌性能,本文首先对冬虫夏草菌株进行液体发酵培养获得发酵物,再对发酵物中不同组分进行了分离、纯化,筛选出具有抗菌活性的组分,并用大量病原菌分析其抗菌性能,最后利用高效液相色谱法对抗菌活性成分的组成进行定性定量分析和比较并测定部分物质在试验条件下的产率.通过液体发酵培养冬虫夏草,采用离心分离、超声破碎、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白等方法对发酵物进行分离提取,结果得到冬虫夏草发酵液、菌丝体提取物、发酵液醇提成分、发酵液水溶成分、菌丝体提取物醇提成分、菌丝体提取物水溶成分、胞内多糖、胞外多糖等组分.以21株非标准病原菌和8株标准病原菌为供试菌株,采用滤纸片扩散法测试了发酵物中不同组分的抗菌性能,结果显示发酵液的醇提成分对细菌类病原菌具有良好的广谱抗菌性,对酵母或真菌类病原菌无明显抑制效果,并结合抗菌谱对抗菌组分的抗菌性能进一步说明,结果显示该抗菌组分有可能为医药领域开发天然产物新药物所用.利用高效液相色谱分析法对抗菌组分内的组成成分进行了初步的分析判断,并对部分物质进行定性定量分析,结果显示该抗菌组分内主要含有核苷类物质:虫草素、次黄嘌呤、少量腺苷,以及疑似物质:鸟嘌呤、黄嘌呤、胞苷.几种物质在试验条件下发酵液中的含量分别为:虫草素2.85mg/100mL、次黄嘌呤2.34mg/100mL、腺苷0.62mg/100mL、疑似鸟嘌呤3.36mg/100mL、疑似黄嘌呤0.64mg/100mL、疑似胞苷0.79mg/100mL.另外,对不抗菌成分中与发酵液醇提成分对应的的菌丝体提取物醇提成分进行高效液相色谱分析,结果显示二者在物质组成上具有较大差异,菌丝体提取物醇提成分中主要含有核苷类物质:腺苷、少量腺嘌呤、少量虫草素,以及疑似物质:尿苷、胸腺嘧啶、黄嘌呤、肌苷.几种物质在试验条件下干菌丝体中的含量为:腺苷5.07mg/g、腺嘌呤0.28mg/g、虫草素0.22mg/g、疑似尿苷0.26mg/g、疑似胸腺嘧啶4.11mg/g、疑似黄嘌呤0.25mg/g、疑似肌苷3.74mg/g.
- 作者：
- 杨吉祥
- 学位授予单位：
- 大连工业大学
- 专业名称：
- 微生物学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2014年
- 导师姓名：
- 周广麒
- 中图分类号：
- R284；R285
- 关键词：
- 冬虫夏草；液体发酵；病原菌；核苷类物质；高效液相色谱
- Cordyceps sinensis; liquid fermentation; pathogens; nucleosides; HPLC;