维生素D受体在SD大鼠原代脂肪细胞分化过程中的表达规律及脂质沉积研究
维生素D受体(Vitamin D Receptor,VDR)属于核受体(类固醇激素/甲状腺激素受体)超家族成员,以核受体(Nuclear VDR,nVDR)和膜受体(Membranae VDR,mVDR)两种形式存在,nVDR分子量大约50kDa左右,mVDR分子量大约60kDa左右,在体内主要介导维生素D的细胞作用,被激活的VDR在细胞核内与视黄酸X受体(retinoid X receptor,RXR)形成异源二聚体,结合于靶基因启动子区的维生素D反应元件上,通过直接或间接方式激活下游靶基因的表达,以介导调节体内钙磷平衡、骨盐沉积、细胞的增殖分化及免疫系统功能等生理过程.然而对于VDR是否在脂肪细胞中表达至今在学术界尚存在较大争议.一方面1,25(OH)2D对脂肪细胞分化的作用存在分歧;另一方面,1,25(OH)2D还会影响脂肪因子的分泌,增加了1,25(OH)2D与脂肪组织互作的复杂性.有研究表明,超表达VDR会抑制3T3L1前体脂肪细胞的分化;但在全身性敲除VDR的小鼠体内却表现出体脂减少的现象.因此,有关VDR对脂肪细胞分化的作用及其方式,仍存有争论,需要进一步验证.本研究以体外培养的SD大鼠原代脂肪细胞为研究材料,采用荧光免疫组化法检测VDR及脂质沉积在脂肪细胞分化过程中的变化规律,利用qPCR和Western Blot方法研究原代脂肪细胞中VDR的作用.为1,25(OH)2D预防和治疗肥胖提供理论依据,对机体的代谢健康有重要意义.主要实验结果如下:(1)VDR在SD大鼠脂肪组织及前体脂肪细胞的细胞核中表达;(2)在SD大鼠前体脂肪细胞分化过程中VDR表达规律为先降低后升高,在细胞单层汇合并分化至第8天时,VDR基因表达量最低,蛋白表达量最低,后又有所升高;(3)细胞中脂滴随分化时间的推移逐渐增加,成脂基因PPAR?在分化16天时与VDR表达量差异极显著,具有统计学意义(p<0.01).(4)VDR有可能参与前体脂肪细胞分化过程,并且当细胞中脂滴达到阈值后会反馈调节PPAR?基因的表达,其作为一个潜在的调节因子来抑制细胞继续成脂,但却并不是通过影响PPAR?基因mRNA降解而实现的,其可能直接或间接作用于PPAR?基因的启动子区而发挥一定的转绿调控作用.
- 作者：
- 杨祎琦
- 学位授予单位：
- 陕西理工学院
- 专业名称：
- 生物化学与分子生物学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2016年
- 导师姓名：
- 王永吉
- 中图分类号：
- R363
- 关键词：
- 维生素D受体；脂肪细胞；PPAR?；免疫荧光染色；Bodipy
- the Vitamin D receptor； Fat cells； PPAR?； Immunofluorescence staining； Bodipy