新疆药桑叶黄酮类化合物提取分离及协同抗氧化活性研究
本研究以新疆特色植物药桑叶为原材料,对其化学成分、药桑叶中总黄酮提取工艺、醇提物乙酸乙酯和正丁醇相黄酮类化合物进行分离鉴定及黄酮单体间体外抗氧化活性等进行研究.1、采用系统化学预试法对药桑叶所含化学成分进行初步研究.结果发现药桑叶中含有:糖类、酚类、有机酸类、黄酮类、挥发油类、生物碱类、甾体类、萜类等多种化学成分.2、在单因素的基础上采用正交实验方法,研究药桑叶中黄酮类化合物的提取条件,建立了适宜的提取工艺:料液比1:25、超声时间45 min、乙醇浓度80%、回流时间60 min.该工艺条件下总黄酮的得率为2.24%.3、采用色谱分离技术从药桑叶分离出11个黄酮类化合物,通过核磁共振(NMR)和高效液相-串联质谱(HPLC-MS-MS)鉴定其结构为芦丁(1)、异槲皮苷(2)、金丝桃苷(3)、山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖(4)、草质素-7-O-(3″-O-β-D-葡萄糖基)-α-L-鼠李糖苷(5)、槲皮素-3-O-β-(2″-O-乙酰基)-吡喃半乳糖苷-7-O-α-吡喃阿拉伯糖苷(6)、红景天素(7)、山奈酚-3-O-β-(2″-O-α-L-吡喃鼠李糖基)-葡萄糖醛酸苷(8)、鼠李素-3-O-半乳糖苷(9)、槲皮素-3′-O-β-D-葡萄糖苷(10)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(11),其中化合物(3)10首次从新疆药桑叶中分离得到.4、以自由基清除率为评价指标,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐(ABTS)自由基清除法对乙酸乙酯相分离得到的单体化合物进行抗氧化活性评价.结果表明,从乙酸乙酯相分离得到4个单体化合物,分别为芦丁、异槲皮苷、金丝桃苷、山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖,对DPPH自由基清除率的半数抑制浓度(IC50)分别为0.0083 mg/mL、0.0237 mg/mL、0.0060 mg/mL、0.0510 mg/mL,对ABTS自由基清除率IC50分别为0.0172 mg/mL、0.0210 mg/mL、0.0120mg/mL、0.0870 mg/mL.4个单体化合物均具有很强的抗氧化活性,且抗氧化活性顺序为:金丝桃苷>芦丁>异槲皮苷>山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖.5、采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法,评价各黄酮单体的抗氧化活性,并筛选出抗氧化活性较好的四种单体化合物-芦丁、金丝桃苷、草质素-7-O-(3″-O-β-D-葡萄糖基)-α-L-鼠李糖苷、红景天素,进行抗氧化协同作用研究,发现红景天素在清除自由基方面和其他化合物具有拮抗作用,其他三种黄酮单体化合物相互结合具有协同增效作用.
- 作者：
- 张贵会
- 学位授予单位：
- 塔里木大学
- 专业名称：
- 生物化学与分子生物学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2016年
- 导师姓名：
- 杨玲
- 中图分类号：
- R29
- 关键词：
- 药桑叶；HPLC-MS-MS；黄酮类化合物；抗氧化活性
- Morus nigra L.； HPLC-MS-MS； Flavonoids； Anti-oxidant activity