小花棘豆中苦马豆素对羊的毒性作用及大鼠星形胶质细胞影响的研究
本文通过在羊饲粮中添加小花棘豆,研究小花棘豆中苦马豆素对羊的毒性作用及体外脑细胞的影响.试验内容分为以下3个方面.试验一:小花棘豆的攻毒试验本试验旨在验证小花棘豆对卡拉库尔羊组织器官的损伤,为研究其抗氧化指标的变化提供依据.试验选取12只体重为16.00±1.40 kg的卡拉库尔羊,采用单因素随机分组设计,将其分为2个组,每组6只羊,每只羊为1个重复,对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加400 g/d小花棘豆干粉.试验期42 d,每7 d进行一次称重、采血,在42 d时,开展屠宰试验,并对羊只的组织进行取样.应用全自动生化分析仪和HE染色分别对血清指标和组织病理进行测定.结果表明:与对照组相比,试验组出现典型的临床症状,组织和器官出现病理变化,AST、ALT、AKP、BUN、GLU、TC含量极显著升高(P<0.01),而TG极显著降低(P<0.01).本试验表明小花棘豆中能够引起卡拉库尔羊的组织器官发生病变和损伤.试验二:小花棘豆对羊血浆及脑组织抗氧化指标的影响本试验旨在研究小花棘豆对卡拉库尔羊血浆及脑组织抗氧化指标的影响,为进一步完善小花棘豆中毒机理提供依据.试验选取12只体重为16±1.4 kg的卡拉库尔羊,采用单因素随机分组设计,将其分为2个组,每组6只羊,每只羊为1个重复,对照组饲喂基础饲粮,试验组基础饲粮中添加400 g/d小花棘豆干粉.试验期42 d,每7 d进行一次称重和采血,在42 d时,开展屠宰试验,并对羊只的脑组织进行取样.应用紫外可见分光光度计和酶标仪分别对血浆和脑组织指标进行测定.结果表明:与对照组相比,1)试验组血浆中SOD活性在连续攻毒15 d时显著降低(P<0.05),攻毒21 d至42 d时极显著降低(P<0.01);试验组GSH含量在连续攻毒8 d时显著降低(P<0.05),攻毒15 d至试验终止时极显著降低(P<0.01);MDA含量在连续攻毒15 d至42 d时极显著升高(P<0.01);TSH和NPSH含量在连续攻毒21 d时显著降低(P<0.05),攻毒到28 d至42 d时极显著降低(P<0.01);连续攻毒21 d时测得AMA含量显著降低(P<0.05),攻毒到36 d至42 d时极显著降低(P<0.01);试验组羊NO含量在攻毒21 d至42 d时极显著升高(P<0.01);试验组羊ET-1含量在攻15d至21 d时显著升高(P<0.05),攻毒36d时表现差异不显著(P>0.05);试验组羊CGRP含量在攻毒21 d时显著升高(P<0.05),攻毒28 d至42 d时极显著升高(P<0.01);2)脑组织中SOD活性和GSH含量极显著低于对照组(P<0.01),而MDA、NO和ET-1含量极显著高于对照组(P<0.01).本试验表明小花棘豆能够导致机体抗氧化能力降低,使得组织器官受到损伤.试验三:小花棘豆中苦马豆素对大鼠星形胶质细胞AQP1、AQP4的影响本试验旨在研究小花棘豆中苦马豆素对星形胶质细胞的毒性作用及水通道蛋白的影响,为研究小花棘豆中苦马豆素与脑水肿之间的关系提供依据.试验采用不同浓度SW(0、0.5、1.0、2.0 mg/mL)细胞培养液对星形胶质细胞进行培养,分别培养3h、6h、12h、24h,采用MTT方法和Western Blot技术对细胞活性、存活率及AQP1、AQP4相对表达量进行测定.结果表明:1)攻毒剂量越大和攻毒时间越长,细胞的存活率越低;2)与对照组相比,各试验组中AQP1、AQP4的相对表达量都有所升高,其中1.0 mg/mL SW组和2.0 mg/mL SW组中AQP1和AQP4相对表达量均极显著增加(P<0.01).本试验表明小花棘豆中苦马豆素能够降低细胞存活率及调节水通道蛋白的表达.
- 作者：
- 何雯
- 学位授予单位：
- 塔里木大学
- 专业名称：
- 动物营养与饲料科学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2016年
- 导师姓名：
- 陶大勇
- 中图分类号：
- S859.82
- 关键词：
- 小花棘豆；苦马豆素；羊；血浆指标；星形胶质细胞；AQP1；AQP4
- Oxytropls glabra DC.； Swainsonine； sheep； Plasma biochemical indexes； Astrocyte； Aquaporin 1； Aquaporin 4