鲍鱼性腺多糖调控BMP-2活性研究与三种海产副产物多糖的分析
海产品加工过程中,会产生大量的副产物.若被丢弃,将造成相当大的经济损失和环境污染.本文以三种海产副产物鲍鱼性腺、扇贝内脏、海参水煮液为研究对象,其主要研究内容及结果如下:(1)对于通过碱水解法制备得到的鲍鱼性腺多糖(AGSP),应用C2C12细胞模型,通过测定碱性磷酸酶活力来分析AGSP调控BMP-2诱导成骨活性.通过PMP衍生化高效液相色谱-电喷雾离子化-多级质谱联用方法确定其单糖以及二糖组成.AGSP在浓度≥10μg/ml时,浓度依赖性的增强BMP-2诱导成骨活性,但这种增强作用与肝素(HP)和硫酸软骨素(CS)相比最弱,正与这三种多糖的硫酸基水平高低相吻合.PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)衍生化后HPLC-MS分析表明,AGSP中含有Man、Gal、GlcA、Xyl、Fuc和Rha,GlcN与GalN含量极低,是一种非糖胺聚糖类的硫酸多糖.(2)经过双酶解法,从鲍鱼性腺中提取得到鲍鱼性腺多糖被分为三部分:1.4mol/L与3mol/L NaCl洗脱液所得多糖(1.4-AGP、3-AGP)以及洗脱液醇沉过程中未沉淀的混合多糖(MAGP).经测定,三种多糖蛋白含量均较低,小于5%,中性糖含量为18±3%,硫酸多糖含量与硫酸基含量均是3-AGP较多,分别是60.22%,7.77%.酸水解后PMP-HPLC-MS分析表明,1.4-AGP与3-AGP含有相同的单糖组成,单糖组成是Xyl,Gal,Man,Fuc,Ara,GlcUA,另外还含有极少量的GlcN,Gal N和Rib,但MAGP多含有Rha,其他类似.另外,三种多糖均含有两种二糖片段,只是两种二糖片段的相对含量存在差异.(3)经过双酶解法制备得到扇贝内脏多糖(SVP),通过化学方法,PMP-HPLC-MS以及红外光谱来分析其组成.SVP蛋白质含量为4.09%,中性糖含量为75.37%,硫酸根含量为0.63%,硫酸多糖含量为8.77%,红外光谱中具有多糖特征吸收峰.SVP中的主要组成单糖是Xyl,Gal,Man,Rha,Fuc,Ara,另外还含有少量的GlcN,Gal N,GalA和Glc.对于酸降解产物中二糖分析,SVP含有GlcA-(1→3)-GalN、GlcA-(1→2)-Man以及另外两种糖醛酸与己糖重复的二糖片段.(4)经过双酶解法制备得到海参水煮液粗多糖,进一步的酶解脱蛋白以及H2O2脱色处理,得到海参水煮液多糖(SBLP).通过PMP-HPLC-MS分析酸水解产物发现,SBLP中的主要组成单糖是GlcN、GalN、Gal、Man、Rib,含有较少的Xyl、Fuc.另外,其中存在GlcA-(1→3)-GalN二糖片段,推测其中存在硫酸软骨素.本论文的研究成果提供了鲍鱼、海参和扇贝的加工副产物中多糖的信息,为这些加工副产物的开发利用提供的科学依据.
- 作者：
- 黄璐
- 学位授予单位：
- 大连工业大学
- 专业名称：
- 食品科学与工程
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2015年
- 导师姓名：
- 朱蓓薇；宋爽
- 中图分类号：
- TS254.9
- 关键词：
- 多糖；鲍鱼；虾夷扇贝；海参；成骨活性
- Polysaccharide； Abalone； Patinopecten yessoensis； Sea cucumber； Osteogenic activity