基于关键分子特性分析的海蜇和海参个体识别的研究
海产品溯源是保障海产品质量的重要手段,同时对规范海产品市场、保护消费者利益和保护地方特色产品具有重要意义.本研究分别以具有地方特色的营口产绵蜇和大连产刺参为主要研究对象,于绵蜇而言,以DNA为关键分子,采用PCR-RFLP技术对绵蛰和沙蛰进行个体鉴定,于刺参而言,以胶原蛋白为关键分子,采用肽指纹图谱的方法对海参个体进行识别,从而为绵蜇和刺参的个体识别提供理论和技术支持.对于海蜇,基于700bp大小的新鲜绵蜇和沙蛰线粒体16S rRNA基因片段,采用9种核酸内切酶(ClaⅠ、EcorV、SacⅡ、HindⅢ、HpaⅠ、XhoⅠ、DraⅠ、HinfⅠ、SspⅠ)对其进行酶切,结果显示5种酶(HindⅢ、HpaⅠ、XhoⅠ、DraⅠ、SspⅠ)可以鉴别新鲜绵蜇和沙蛰,其中HindⅢ和HpaⅠ在绵蛰中没有位点,在沙蛰中有一个位点,酶切片段大小分别为373/277 bp和420/230 bp,XhoⅠ和DraⅠ在沙蛰中没有位点,在绵蛰中有一个位点,酶切片段大小分别为142/469 bp和429/182 bp,SspⅠ在绵蛰和沙蛰中各有一个位点,酶切片段大小分别为477/134 bp和392/133 bp.并用腌渍绵蜇对此法进行了验证,结果显示与新鲜绵蜇结果一致,初步证实了此法的可靠性.采用上述5种酶对市场上购买的5种腌渍海蜇进行了PCR-RFLP实验,结果显示2种产品为绵蜇,1种为沙蛰,2种为其他海蜇.对于海参,采用鱼皮明胶的提取方法对海参明胶进行提取并进行性质对比研究,结果显示海参明胶无法溶出,这与其极端不溶解性有关.基于海参体壁和鱼皮酶促溶性胶原蛋白(PSC)的肽指纹图谱分析,表明采用V8酶和α-糜蛋白酶对其进行酶解,二者呈现完全不同的图谱,可以有效区分二者.采用上述能够鉴别海参和鱼皮PSC的两种内切酶对南北海参胶原蛋白进行酶解,二者呈现完全一致的谱图,无法有效鉴别.同时,DSC测试结果显示南参体壁酶促溶性胶原蛋白的热变性温度略高于北参,但二者无显著性差异.
- 作者：
- 王凤林
- 学位授予单位：
- 大连工业大学
- 专业名称：
- 食品科学与工程
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2015年
- 导师姓名：
- 朱蓓薇；吴海涛
- 中图分类号：
- TS254.1
- 关键词：
- 海蜇；mt-16S rRNA；PCR-RFLP；海参；鱼皮；胶原蛋白
- jellyfish； mt-16S rRNA； PCR-RFLP； sea cucumber； fish skin； collagen