新疆灰枣水溶性多糖的提取及其体外抗氧化活性研究
多糖是一种天然药物和保健品原料,具有广阔的应用前景和市场需求.新疆特色灰枣(Zizyphusjujuba Mill)具有很高的营养价值和药用价值,灰枣多糖也具有重要的生物活性.目前关于新疆灰枣多糖的结构和生物活性研究较少,本文以新疆灰枣为试材,对其水溶性多糖的提取工艺、大孔树脂纯化工艺、多糖的分级纯化、一级结构鉴定及体外抗氧化活性进行了研究,结果如下:1本文根据Box-Behnken响应面优化的灰枣水溶性多糖最佳提取工艺条件为:热水温度90℃,时间140min,料液比1:25(g/mL);在此条件下灰枣多糖得率为53.46%.2优化了灰枣水溶性多糖纯化工艺:通过静态吸附-解吸试验考察了9种大孔树脂对灰枣多糖的吸附量、吸附率及解吸率,筛选出AB-8树脂作为理想树脂,并采用响应面法优化了AB-8树脂纯化灰枣总多糖的工艺参数.结果表明,最佳纯化条件是:上样浓度0.4mg/mL、上样量30mL、上柱速率2.0mL/min、pH=6.0、洗脱剂浓度50%、洗脱流速1.5mL/min、洗脱剂用量3.0mL,通过大孔吸附树脂纯化后的灰枣多糖吸附率和解吸率分别是91.74%和78.32%,纯化前后多糖得率分别为49.67±1.29(mg/g)和65.57±1.75(mg/g).3用DEAE-纤维素DE-32对灰枣精制多糖进行初步分离,主要得到HWP1、HWP2、HWP3、HWP4、HWP5五个组分.再用SephadexG-100柱层析分别对多糖HWP1、HWP2、HWP3、HWP4、HWP5进一步分离纯化得到了HWP1a、HWP2a、HWP3a、HWP4a、HWP5a组分,经紫外光谱检测显示灰枣多糖HWP3a、HWP4a和HWP5a在260-280nm处无核酸和蛋白的特征吸收峰,经红外光谱检测证实灰枣多糖HWP1a、HWP2a、HWP3a、HWP4a和HWP5a有多糖类物质特征吸收峰.4纯化多糖一级结构的初步研究:(1)灰枣多糖HWP-1a、HWP-2a、HWP-3a、 HWP-4a和HWP-5a经红外光谱扫描,在3700-3200cm-1、2970-2840cm-1、1420附近、1200-1000cm-1有特征的吸收峰,说明多糖具有羟基、羧基结构.β-D-吡喃糖C-H的变角振动吸收峰在870cm-1处.(2)HWP-1a、HWP-2a、HWP-3a、HWP-4a和HWP-5a的相对分子质量分别约为:226.7kDa、739.2kDa、44.44kDa、115.2kDa、117.4kDa.(3)HWP-1a由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖等五种单糖组成,其摩尔比为2.85:2.14:26.77:1.76:3.28;HWP-2a由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖等五种单糖组成,其摩尔比为1.38:4.26:8.18:7.27:3.79;HWP-3a由甘露糖、鼠李糖、麦芽糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖等六种单糖组成的,其摩尔比为1:4.33:15.34:23.18:28.71:27.44;HWP-4a主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、麦芽糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖七种单糖组成,其摩尔比为3.20:3.60:1.93:4.28:8.71:7.21:4.48;HWP-5a由甘露糖、鼠李糖和葡萄糖等三种单糖组成,摩尔比为3.05:1.52:30.26.5灰枣多糖的体外抗氧化活性研究:采用分光光度计法测定了纯化前后灰枣多糖对DPPH自由基、羟基自由基、过氧阴离子自由基和ABTS+自由基的清除能力,以及多糖的还原力、螯合力.结果表明:灰枣多糖具有较好的清除自由基能力,在供试浓度范围内,呈剂量效应关系.
- 作者：
- 鲁小静
- 学位授予单位：
- 塔里木大学
- 专业名称：
- 生物化学与分子生物学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2014年
- 导师姓名：
- 白红进
- 中图分类号：
- TS255.1；TQ281
- 关键词：
- 灰枣；多糖；多糖组成；体外抗氧化活性
- Zizyphus jujuba Mill.； polysaccharide； polysaccharide composition； antioxidant activity invitro