可溶性CD40配体对THP-1细胞株增殖及Bcl-2、P53mRNA表达的影响
The Effects of Soluble CD40Ligand on THP-1Cell Proliferation and the Expression of Bcl-2, P53mRNA
目的:探讨可溶性CD40配体(sCD40L)对人急性单核细胞白血病THP-1细胞株增殖、凋亡以及凋亡相关基因BCL-2、P53mRNA表达的影响.方法:(1)采用CCK-8法检测不同浓度sCD40L对急性单核细胞白血病THP-1细胞株体外增殖的影响,确定最佳干预浓度;(2)采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;(3)通过实时荧光定量PCR法检测sCD40L对THP-1细胞BCL-2、P53mRNA表达的影响.结果:(1)不同浓度sCD40L对THP-1细胞作用24h、48h、72h小时后均有不同程度的抑制的作用,与细胞对照组相比较,均有显著差异(p<0.05),其中浓度为4μg/ml对急性单核细胞白血病THP-1细胞抑制作用最明显;同一浓度、不同作用时间下,72h抑制作用最明显.(2)AnnexinV-FITC/PI双染色显示,THP-1细胞与sCD40L组共育24h、48h、72h后,均见明显凋亡,与THP-1细胞对照组相比较有显著差异(P<0.05).同一浓度、不同时间下,在72h时对THP-1细胞凋亡最明显;(3)实时荧光定量PCR测定结果显示:在同一时间内sCD40L4.00μg/ml组与细胞对照组相比较,Bcl-2mRNA的表达量明显下调,而P53mRNA的表达明显上调,且与细胞对照组相比较均有显著差异(P﹤0.05);在不同时间内,两种基因的表达量与时间有相关性.结论:(1) sCD40L在体外能够抑制THP-1细胞增殖,诱导THP-1细胞发生凋亡,与作用浓度、时间相关;(2) sCD40L抗白血病作用机制与下调Bcl-2mRNA表达、上调P53mRNA表达相关.
- 作者：
- 章莹
- 学位授予单位：
- 遵义医学院
- 专业名称：
- 内科学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2014年
- 导师姓名：
- 陈琦
- 中图分类号：
- R733.71
- 关键词：
- sCD40L；THP-1；细胞凋亡；Bcl-2；P53
- sCD40L；THP-1；cell apotosis；Bcl-2；P53