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丹参活性化合物对蚕豆根尖细胞的遗传毒性研究

丹酚酸A、丹酚酸B及原儿茶醛为丹参活性化合物,可通过自身的强抗氧化活性对机体产生保护作用.本文研究了丹酚酸A、丹酚酸B及原儿茶醛对蚕豆根尖细胞遗传毒性的影响,探究其抗突变活性,为丹参活性化合物的开发应用提供参考依据.本文建立了适于蚕豆根尖细胞的改良彗星实验,应用改良彗星实验研究丹酚酸A、丹酚酸B及原儿茶醛(11000μg·mL-1)对蚕豆根尖细胞DNA损伤的影响,以及它们对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CP)(100μg·mL-1)的拮抗作用;应用微核实验研究丹酚酸A、丹酚酸B及原儿茶醛(11000μg·mL-1)单独染毒对蚕豆根尖细胞的遗传毒性影响,研究丹酚酸A、丹酚酸B及原儿茶醛(11000μg·mL-1)与CP之间不同染毒秩序(方法Ⅰ:同时加入丹参活性化合物和CP;方法Ⅱ:先加入丹参活性化合物,后加入CP;方法Ⅲ:先加入CP,后加入丹参活性化合物)对细胞遗传物质的影响,探讨其抗诱变机制;以微核实验研究丹酚酸A、丹酚酸B、原儿茶醛与100μg·mL-1Cr(Ⅵ)联合染毒对蚕豆根尖细胞遗传物质的影响.研究结果表明:(1)改良彗星实验效果稳定.(2)彗星实验证明:丹酚酸A(5500μg·mL-1)、丹酚酸B(1500μg·mL-1)与原儿茶醛(51000μg·mL-1)对蚕豆根尖细胞DNA无损伤;丹酚酸A、丹酚酸B(11000μg·mL-1),原儿茶醛(51000μg·mL-1)能够有效抑制CP的诱变作用.(3)微核实验证明:丹酚酸A、丹酚酸B、原儿茶醛(11000μg·mL-1)无致突变作用;它们在各种机制下都能够抑制CP诱导细胞形成微核,促进细胞分裂,减少畸变染色体;丹酚酸A(100μg·mL-1)、丹酚酸B(50μg·mL-1)、原儿茶醛(1000μg·mL-1)的抗突变活性最强.(4)丹酚酸A、丹酚酸B及原儿茶醛能够有效抑制Cr(Ⅵ)的诱变活性;它们抗突变活性大小为丹酚酸B>丹酚酸A>原儿茶醛.通过蚕豆根尖细胞彗星实验、微核实验可以初步进行化合物的安全评价:丹酚酸A、丹酚酸B及原儿茶醛在一定的剂量范围内无致突变性;可以推测化合物作用机制:丹参活性化合物通过其抗氧化活性可以直接使诱变剂失活,也可以抵抗诱变剂诱变作用,而且能够修复遗传损伤,但其具体的作用机制,还需进一步探讨.此外,本论文的研究结果可为进一步研究丹参在防治突变方面的应用提供参考依据.

作者:
王婧
学位授予单位:
大连工业大学
专业名称:
农产品加工及贮藏工程
授予学位:
硕士
学位年度:
2010年
导师姓名:
朱靖博
中图分类号:
R285
关键词:
丹酚酸A;丹酚酸B;原儿茶醛;蚕豆;遗传毒性;抗突变
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