IUD避孕大鼠无创建模法评价及宫宁颗粒调控IUD模型大鼠子宫血管重塑机制的研究
Comments on the Non-incision Modeling Method of Rat IUD and Research on Regulation of Gongning Granules on the IUD Remodeling Mechanism of Uterine Vessels
目的:评价IUD避孕大鼠无创建模法及探讨宫宁颗粒调控IUD模型大鼠子宫血管重塑机制方法:方法一:以SD雌性大鼠为实验对象,将50只大鼠随机分为5组:无创模型组、开腹模型组、无创假手术组、开腹假手术组、正常对照组.制作IUD无创模型、IUD开腹模型、IUD无创假手术模型、IUD开腹假手术模型.开腹观察IUD放置成功率、IUD脱落率、避孕率、子宫炎症率.方法二:以SD雌性大鼠为实验对象,将50只大鼠随机分为5组,分组方法及制作IUD模型方法同上述方法一.用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠腹腔冲洗液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的浓度,检测宫腔冲洗液血栓素(TXA2)代谢产物血栓烷(TXB2)、前列腺素(PGI2)代谢产物6-酮-前列腺素(6-keto-PGF1α)、纤溶酶原激活物(t-PA)的浓度及检测子宫组织匀浆碱性磷酸酶(AKP)、碳酸酐酶(CA)的浓度.方法三:以SD雌性大鼠为实验对象,将50只大鼠随机分为5组,模型组、消炎痛组、宫宁颗粒组、假手术组、正常对照组,制作IUD无创模型及IUD无创假手术模型.用免疫组化S-P法检测各组大鼠子宫血管平滑肌细胞(VSMC)表型标志物α-SM-肌动蛋白(α-SM-action)、VSMC增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,计算子宫VSMC增殖率(PCNA/α-SM-action阳性细胞数*100%).结果:结果一:无创模型组、开腹模型组IUD放置成功率分别为90%、80%;IUD脱落率分别为0、10%;避孕率均为100%;子宫炎症率分别为10%(无创模型组)、40%(开腹模型组)、30%(开腹假手术组).结果二:①无创模型组大鼠腹腔冲洗液TNF-α的浓度极显著低于开腹模型组浓度,差异有极显著性(P<0.01).②无创模型组大鼠腹腔冲洗液TGF-β浓度极显著低于开腹模型组浓度,差异有极显著性(P<0.01).③无创模型组大鼠腹腔冲洗液ICAM-1浓度接近开腹模型组浓度,差异无显著性(P>0.05).④无创模型组大鼠宫腔冲洗液TXB2的浓度极显著高于开腹模型组浓度,差异有极显著性(P<0.01).⑤无创模型组大鼠宫腔冲洗液6-keto-PGF1α的浓度极显著低于开腹模型组浓度,差异有极显著性(P<0.01).⑥无创模型组大鼠宫腔冲洗液t-PA的浓度极显著低于开腹模型组浓度,差异有极显著性(P<0.01).⑦无创模型组大鼠宫腔冲洗液6-keto-PGF1a/TXB2比率极显著低于开腹模型组比率,差异有极显著性(P<0.01).⑧无创模型组大鼠子宫组织匀浆AKP浓度接近开腹模型组浓度,差异无显著性(P>0.05).⑨无创模型组大鼠子宫组织匀浆CA浓度接近开腹模型组浓度,差异无显著性(P>0.05).结果三:①模型组大鼠子宫内膜VSMC表型标志物α-SM-action的表达较正常对照组极显著降低,治疗后各组α-SM-action表达已显著升高及极显著升高.其中,宫宁颗粒组α-SM-action的表达与模型组比较,极显著升高,已接近正常对照组表达,差异无显著性(P>0.05);而消炎痛组虽显著升高α-SM-action的表达,但与宫宁颗粒组比较,差异有极显著性(P<0.01).②模型组大鼠子宫内膜VSMC增殖细胞核抗原PCNA的表达较正常对照组极显著升高,治疗后各组PCNA的表达均已极显著降低.其中,宫宁颗粒组PCNA表达与消炎痛组比较,显著性降低,差异有显著性(P<0.05),表明宫宁颗粒组较消炎痛组表达更接近正常对照组表达.③模型组大鼠子宫内膜VSMC增殖率PCNA/a-SM-action的比率较正常对照组极显著升高,治疗后各组VSMC增殖率PCNA/a-SM-action的比率已极显著降低.其中,宫宁颗粒组增值率与消炎痛组增值率比较,差异有极显著性(P<0.01),表明宫宁颗粒组增值率较消炎痛组更接近正常对照组.结论:结论一:从行为学、子宫形态学两方面对无创模型组大鼠、开腹模型组大鼠进行了仔细的肉眼观察和对比,可以看出开腹模型组大鼠患炎症的程度明显高于无创模型组大鼠.通过对比分析看出,IUD放置成功率开腹模型组略低于无创模型组,差异无显著性(P>0.05);IUD脱落率开腹模型组略高于无创模型组,差异无显著性(P>0.05);避孕率相同;子宫炎症率开腹模型组明显高于无创模型组,差异有显著性(P<0.05).所以无创IUD造模方法优于开腹IUD造模方法.结论二:从腹腔冲洗液(TNF-α、TGF-β、ICAM-1)、宫腔冲洗液(TXB2、6-keto-PGF1α、t-PA)、子宫组织匀浆(AKP、CA)各指标的显著变化说明开腹模型组比无创模型组炎症高,对子宫损伤重,更易引起IUD出血副反应.实验一、实验二分别从宏观、微观两方面对无创模型组、开腹模型组各指标进行了对比分析,从实验一、实验二的结论中看出,IUD避孕大鼠无创建模法优于开腹建模法,IUD无创建模法是理想的IUD避孕大鼠建模法.结论三:具有祛瘀清热止血调经作用的宫宁颗粒,通过调控IUD模型大鼠子宫内膜VSMC的α-SM-action、PCNA表达,促使VSMC由合成表型VSMC(病理性)逆转为收缩表型VSMC(生理性),从而使受损的模型大鼠子宫内膜血管由病理性重塑逆转为适应性重塑,减轻了模型大鼠子宫内膜VSMC的显微、超微结构的形态学损伤,消除了模型大鼠子宫内膜血管构筑的异常,达到调控IUD模型大鼠子宫血管重塑的目的,从而恢复了子宫内膜血管正常生理功能.
- 作者:
- 岳恒学
- 学位授予单位:
- 山东中医药大学
- 专业名称:
- 中医妇科学
- 授予学位:
- 博士
- 学位年度:
- 2013年
- 导师姓名:
- 刘瑞芬
- 中图分类号:
- R271.9
- 关键词:
- IUD避孕大鼠;无创建模评价;宫宁颗粒;模型大鼠子宫血管重塑机制;调控
- Rat IUD;Non-incision modeling evaluation;Gongning granules;Remodeling mechanism of uterine blood vessels of model rats;Regulation and control