新疆南疆地区奶牛乳房炎性金黄色葡萄球菌生物膜形成及其影响因素的研究
Biofilm Formation and Influencing Factors of Staphylococcus Aureus Isolated from the Southern Xinjiang
大量的研究表明,金黄色葡萄球菌是引起奶牛乳房炎亚临床感染的主要病原菌,其引起的泌乳系统疾病即奶牛乳房炎严重影响牛奶的品质及奶牛养殖业的发展,金黄色葡萄球菌引发的奶牛乳腺炎具有治愈率低并且反复发作的特点,目前就金黄色葡萄球菌引发的奶牛乳腺炎的治疗主要依赖于抗生素治疗法.随着抗生素的大量使用,导致了耐药菌株的出现.就这一现象,有学者提出这是生物膜的形成导致的结果.本研究主要针对本实验室从患有奶牛乳腺炎的牛乳中分离获得的菌株采用分子生物学方法进行金黄色葡萄球菌分子水平的分离鉴定.利用微量板半定量法对金黄色葡萄球菌的临床菌株进行生物膜的表性及理化因素对其影响的检测.并利用新疆特色植物苦豆子、醉马草、盐穗木、甘草的水煎液,研究其对金黄色葡萄球菌生物膜的形成能力的影响,为药用植物治疗奶牛乳腺炎的奠定理论基础.实验结果表明:1)对于本实验室分离获得的菌株,经16S rDNA序列测序分析,获得金黄色葡萄菌112株,对其进行生物膜相关基因检测,其中含有icaA基因15株,约占检测菌株总数的13.4%(15/112),检测本实验对分离获得的112株金黄色葡萄球菌,分别进行sarA、ccp、luxS、sigB、agrC、bap、tcaR7个基因的PCR检测,检测结果表明,112株金黄色葡萄球菌分离株上述7种基因的分布存在较大差异,其生物膜形成能力也存在差别,具体结果见表3.其中34株扩增出luxS基因的菌株和36株扩增出sarA基因的菌株,各有6株能形成不同强度的生物膜,分别占基因扩增阳性菌株数的18%和17%.2)本实验主要以TSB为基础培养基,添加不同浓度的葡萄糖、氯化钠、酪蛋白、乳糖以及改变pH值等研究金葡菌临床分离株10-88-2生物膜形成能力的变化实验结果表明葡萄糖和氯化钠对金葡菌在不影响细菌生长的情况下,促进金葡菌生物膜的形成.酪蛋白抑制生物膜的形成的作用是在促进生物膜形成的基础上,而高浓度乳糖在不促进细菌生长的情况下抑制生物膜的形成.而就pH值而言,碱性及酸性环境都不利于金黄色葡萄球菌细菌生长和生物膜的形成.3)新疆特色植物苦豆子、醉马草、盐穗木、甘草水煎液对金黄色葡萄球生物膜的影响.研究发现盐穗木及甘草水煎液对金黄色葡萄球菌生物膜的形成抑制作用建立在抑制其细菌生长的基础上.苦豆子及醉马草水煎液对金黄色葡萄球菌生物膜的形成的抑制作用是建立在不抑制细菌生长的情况下,导致这一结果表明苦豆子及醉马草水煎液对金黄色葡萄球菌生物膜的抑制是基于对其基因水平的调控而实现的.苦豆子及醉马草的生物总碱对金葡菌生物膜的形成有较好的抑制作用.
- 作者：
- 李延荣
- 学位授予单位：
- 塔里木大学
- 专业名称：
- 生物化学与分子生物学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2013年
- 导师姓名：
- 陈伟
- 中图分类号：
- S858.23
- 关键词：
- 奶牛乳腺炎；金黄色葡萄球菌；生物膜
- Bovine mastitis；Staphylococcus aureus；Biofilm