双峰驼黏膜免疫效应分子sIgA分泌细胞在小肠分布规律的研究
Studies on the Distribution of Bactrian Camel Mucosal Immune Effector Molecules SIgA Secreting Plasma Cells in Bactrian Camel Small Intestine
为明确双峰驼小肠黏膜免疫效应分子sIgA的分泌细胞的分布规律,本文采用硫酸铵盐析沉淀法和DEAE-52纤维素层析柱分离纯化双峰驼初乳中的sIgA,双峰驼初乳sIgA提取方法和检验检测方法进一步优化,利用30%和50%两种饱和度的硫酸铵进行盐析沉淀和DEAE-52纤维素层析柱快速纯化出高浓度双峰驼sIgA,利用变性电泳和非变性电泳相结合的手段检测所纯化的sIgA,而后,利用本实验室制备的双峰驼sIgA运用常规免疫方法制备出兔抗双峰驼sIgA血清,为了确保下一步免疫组织化学方法定位双峰驼小肠黏膜IgA分泌浆细胞的准确性,将所制备的兔抗双峰驼sIgA血清进一步的分离纯化,得到高浓度的兔抗双峰驼sIgA抗体,最后,通过免疫组织化学染色法将双峰驼小肠黏膜内IgA分泌浆细胞进行染色定位,并利用OLYMPUS BX-UCB/BX61型光学显微镜及图像采集系统和IBM SPSS Statistics19进行相关的数据分析,确定了双峰驼小肠黏膜内IgA分泌浆细胞的分布特点.在双峰驼初乳sIgA的分离纯化过程中,优化了双峰驼初乳sIgA的分离提取方法,确定了双峰驼sIgA的结构包含J链、轻链、重链和分泌片,大小分别在15Ku、20Ku、55Ku、75Ku左右,双峰驼sIgA分子量在380Ku左右.通过免疫组织化学染色发现,双峰驼小肠黏膜中的IgA分泌浆细胞主要分布在肠绒毛基部的固有层中.在三段小肠黏膜固有层中,IgA分泌浆细胞密度呈现出先增后减趋势,在空肠中段达到最大值,达到9.89±2.47个/10~4μm~2,这与已有关于仔猪小肠黏膜IgA分泌浆细胞密度最大值出现在十二指肠存在差异.关于双峰驼sIgA分子量的研究和双峰驼小肠黏膜固有层中IgA分泌浆细胞密度进行了初步统计,进一步丰富了黏膜免疫学科中关于IgA分泌浆细胞的相关数据.
- 作者：
- 张林江
- 学位授予单位：
- 甘肃农业大学
- 专业名称：
- 基础兽医学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2012年
- 导师姓名：
- 王雯慧；刘磊
- 中图分类号：
- S852.4；S824
- 关键词：
- 双峰驼；小肠；sIgA；IgA分泌浆细胞
- Bactrian camel； small intestine； sIgA； IgA secreting plasma cells
- 基金项目：
- 甘肃省自然科学%国家自然科学%教育部博士点