多巴胺受体在胃粘膜的细胞定位及其对胃酸分泌的调节
背景和目的:多巴胺不仅是重要的中枢神经递质,也是消化道内重要的神经递质和消化道功能的调控因子.在消化系统,多巴胺参与多种功能的调节,如消化系统的外分泌、液体的吸收、胃肠动力和粘膜保护等.帕金森病作为一种以多巴胺能神经元缺失为主的神经退行性病变,具高胃溃疡发生率.相反,在精神分裂症患者,他们往往存在中枢神经系统多巴胺过多和/或功能亢进,胃溃疡发病率却显著降低.有报道多巴胺可以通过抑制胃酸分泌来参与粘膜保护作用,然而多巴胺调节胃酸分泌的机制尚不清楚.己经证明除神经系统来源的多巴胺外,胃泌酸腺中的壁细胞可以产生大量多巴胺.在体研究发现多巴胺可以通过作用于外周的多巴胺受体来调节胃酸的分泌,然而多巴胺受体在胃粘膜上皮细胞的定位及多巴胺是否可以通过自分泌的方式直接作用于壁细胞调节其泌酸功能,还是通过影响其他一些泌酸相关物质,如生长抑素、组织胺、前列腺素等的释放来发挥作用并不清楚.本研究旨在探讨多巴胺及其受体对胃酸分泌调节的可能机制.
方法:采用实时PH滴定系统记录多巴胺对离体小鼠胃粘膜胃酸分泌的影响.用酶联免疫吸附试验/放射免疫法/质谱-高压液相色谱分析联用法测定多巴胺、生长抑素等的含量.利用免疫荧光双标技术检测5种多巴胺受体亚型在胃粘膜的细胞定位.通过制备内源性多巴胺增多和降低的动物模型,应用实时荧光聚合酶链反应(Real-timePCR)法和/或蛋白免疫印记法(WesternBlot)检测多巴胺受体、TH、DAT的基因和蛋白水平的改变.
结果:
1.首次从蛋白和基因水平上证实D1-D3租D5受体免疫阳性细胞在大鼠胃粘膜和肠神经丛都有分布,主要位于胃腺下2/3部,其中以D1和D2含量最高.D4受体免疫阳性细胞仅在肠神经丛有分布.
2.免疫共定位研究发现大量D1、:D2受体和部分D5受体分布在主细胞上.在生长抑素能细胞上亦有D1、D2和少量D5的分布.壁细胞和颈粘液细胞上没有任何多巴胺受体亚型的分布.
3.PH滴定结果显示多巴胺可以作用于离体胃粘膜上的多巴胺受体调节胃酸分泌.多巴胺对小鼠粘膜基础酸分泌率没有抑制作用,而对组胺引起的最大胃酸分泌率呈现出显著性的抑制作用.
4.外周内源性多巴胺增高模型(6-OHDA大鼠模型)胃粘膜D2受体基因显著增高,D5受体表达显著降低,D1和D3受体表达未见明显改变.生长抑素含量表现有增高趋势,胃蛋白酶含量明显增高.相反,外周内源性多巴胺降低模型(MPTP小鼠模型)胃粘膜生长抑素含量趋于降低.
结论:本研究结果表明:多巴胺受体主要分布在胃粘膜主细胞上,而不在壁细胞和颈粘液细胞上.多巴胺对胃酸分泌的调节可以通过作用于胃粘膜上的多巴胺受体发挥作用,然而多巴胺对胃酸分泌的调节并不是直接的作用,即壁细胞产生的多巴胺并不能通过自分泌的作用方式来调节其泌酸功能,可能通过作用于D细胞上的D2和/或D5受体来调节生长抑素的释放,最终影响胃酸分泌.
- 作者：
- 王倩
- 学位授予单位：
- 首都医科大学
- 专业名称：
- 生理学
- 授予学位：
- 博士
- 学位年度：
- 2012年
- 导师姓名：
- 朱进霞
- 关键词：
- 多巴胺受体；胃酸分泌；壁细胞；胃粘膜；细胞定位
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