甲状腺乳头状癌中相关风险因素(肿瘤相关巨噬细胞、IL--13和CXCR4)的分析研究
甲状腺乳头状癌(PTC)是最常见的内分泌癌,近年来的发病率呈日益增加趋势.以往的研究虽然对PTC相关的风险因素和发病机制有所报道,但仍缺乏全面深入的理解.本研究从肿瘤微环境、癌相关蛋白因子及染色体变异等三个层面在PTC发生发展中的作用进行了分析.
研究目的:
1.本研究旨在对PTC的分子遗传学机制进行初步探讨,试图发现新的生物学标志,为PTC的诊断和治疗提供理论基础.
2.阐述肿瘤相关巨噬细胞(TAM)、IL-13及CXCR4在PTC发生发展中的作用及机制.
研究方法:
1.通过免疫组化检测TAM标记物CD68在PTC及其他甲状腺良性病变中的表达情况,进一步分析组织TAM密度与PTC临床表型的相关性;从新鲜PTC组织中分离获得TAM,通过real-time PCR及免疫荧光检测细胞因子和受体表达特征确认TAM表型.
2.采用多重连接探针扩增技术(MLPA)检测PTC及结节性甲状腺肿(NG)标本中基因拷贝数量变化,再用免疫组化方法验证变化基因的蛋白表达情况.
3.免疫组化方法检测CXCR4在甲状腺良恶性病变中蛋白水平层面的表达,并分析其与临床表型的相关性.
研究结果:
1 TAM在PTC中的密度显著增加,和甲状腺良性病变相比存在显著统计学差异.
2 PTC中TAM的浸润密度和PTC的淋巴结转移密切相关,和TNM分期呈正相关,和PTC其他特征如BRAF突变,年龄,性别,多灶癌,肿瘤大小及是否伴有桥本氏甲状腺炎无关.
3连续切片免疫组化染色显示CD68阳性的细胞分布和CD163阳性细胞分布相同,分离获得的PTC中原代TAM和正常人的PBMC(外周血单核细胞)相比,IL-10和CD206表达明显增加,提示PTC中的TAM具有M2型巨噬细胞特征.
4 MLPA分析发现,在甲状腺乳头状癌中位于染色体5q23-31的IL-13基因组拷贝数扩增.免疫组化进一步验证了与结节性甲状腺肿相比,IL-13蛋白在甲状腺乳头状癌中呈高表达.
5 CXCR4在甲状腺癌中表达率高达76.0%,而在甲状腺良性病变中阳性率仅为9.5%,两组间有显著性差异.甲状腺恶性肿瘤的分化程度与肿瘤细胞CXCR4的表达程度相关.
结论:
1 TAM在PTC中的密度显著高于甲状腺良性病变,且与PTC的淋巴结转移及临床分期相关,并高水平表达M2型相关的因子及受体.
2 IL-13基因组拷贝数的增加和蛋白表达水平的提高可能是鉴别PTC及结节性甲状腺肿的分子标志物之一.
3 CXCR4在包括PTC在内的所有甲状腺恶性肿瘤中高度表达,其表达程度与甲状腺恶性肿瘤的分化程度相关,可以做为诊断甲状腺恶性肿瘤的辅助指标且可能与甲状腺癌的分化程度及侵袭性密切相关.
- 作者：
- 蔚青
- 学位授予单位：
- 上海交通大学
- 专业名称：
- 病理学与病理生理学
- 授予学位：
- 博士
- 学位年度：
- 2012年
- 导师姓名：
- 肖家诚
- 关键词：
- 肿瘤相关巨噬细胞；甲状腺乳头状癌；肿瘤微环境；蛋白因子；染色体变异
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