调节性T细胞在SIVmac239感染中国恒河猴中的变化及其机制的初步研究
CD4+CD25+调节性T细胞是1995年才发现的一个具有免疫抑制功能的T细胞亚群,主要通过细胞与细胞间直接接触和分泌抑制性细胞因子发挥作用,在维持机体免疫自稳、防止自身免疫以及肿瘤免疫、移植免疫等方面起着重要作用.有关TregHIV/SIV病毒感染及AIDS的进展关系密切,但却有两种不同的观点.一种认为Treg的数量和功能受到损伤,从而导致宿主免疫系统过度活化.另一种则认为Treg在早期抑制了针对HIV/SIV的特异性的免疫反应,从而导致机体无法清除感染的病毒.本文利用动物模型对CD4+CD25+调节性T细胞在SIV感染后的数量和功能做了动态的检测,并对其中的机制做了初步的探讨.
我们首先建立了SIVmac239病毒株对中国起源的恒河猴感染的动物模型,建立了前病毒的检测方法、血浆病毒载量的测定方法、血浆病毒特异性抗体的测定方法,以及病毒的分离方法,并获得了早期感染的相关数据.
在研究中我们发现,SIV感染后的1周后即可在恒河猴外周单个核细胞DNA中检测到前病毒.病毒血症也在1周后出现,并很快达到高峰.不同的个体对病毒感染的体液免疫不尽相同,血浆抗体很快出现,但是99003猴抗体下降很快,而99083猴则保持了一定数量的抗体.同时,伴随SIV的感染进程的还有T淋巴细胞的数量变化,CD4+T细胞数量持续下降,而CD8+T细胞数量则在增加,出现CD4/CD8倒置的现象.以上说明恒河猴被SIV所成功感染.
在该动物模型的基础上,我们利用体内传代的SIVmac239病毒株,对4只健康恒河猴进行了感染,并对CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)亚群在数量上的变化进行了检测,并对其中的机制做了初步探讨.
我们在研究中发现,外周血中的Treg在SIV感染后无论是绝对数量还是在占CD4+T细胞中的相对数量均有增加,而且Treg仍然保持了对靶细胞的抑制功能.对腹部淋巴结的分析显示,SIV感染后的一段时期内,该部位FoxP3mRNA的表达水平也在上升,TGF-β、IL-10的转录也显著增加.前者可以通过抑制树突状细胞间接抑制效应细胞,而后者则是一个抑制性的细胞因子,可以直接作用于靶细胞.因此,我们推测SIV引起免疫系统的过度活化可能不是由于Treg功能的受损,其中的机制需要深入研究.
Treg表达CCR5表面分子(HIV辅助受体之一),同时也有CD4分子的表达,因此推测HIV/SIV可以感染Treg.但是国内外这方面的文献很少.我们对Treg中前病毒的检测发现,SIV可以感染Treg,而且对Treg的感染比例高于CD4+CD25-T细胞.这个结果与Treg绝对数量的上升的结果说明,SIV感染Treg但可能却没有杀伤Treg,因此Treg在数量上有所增加.不过,其中的机制仍有待于进一步的研究.
在对SIV引起的体液免疫的研究中还发现,机体针对SIV不同抗原的抗体有不同的模式.部分抗原很快就产生了比较强的反应,但是却不能维持高水平的表达.而针对p27蛋白的抗体产生比较晚,但却长时间维持在比较高的水平.是否这样高水平的抗体有助于控制病毒复制是个值得探讨的问题.
- 作者：
- 李少遊
- 学位授予单位：
- 中国科学院研究生院
- 专业名称：
- 动物学
- 授予学位：
- 博士
- 学位年度：
- 2009年
- 导师姓名：
- 郑永唐
- 关键词：
- SIVmac239病毒株；调节性T细胞；动物模型；恒河猴
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