常山碱的提取、分离及其药效学研究
Study on Extraction and Abstraction of Dichroine and Its Pharmacodynamics
鸡球虫病是一种重要的寄生虫病,分布广,感染率高,常发生在15~50日龄的雏鸡,若不能有效控制,其现场发病率可达50 %~70 %,死亡率可达20 %~30 %,严重爆发时其死亡率可高达80 %.据统计,全球养鸡业每年仅球虫病造成经济损失就达20亿英镑.目前对该病的防治仍以化学合成药及抗生素为主,但由于长期应用,易产生抗药性,且在畜产品中因药物残留而影响人类的健康.鉴于此,人们将目光转向非抗生素防治研究,如中草药.迄今为止,关于常山中单体的分离报道较为深入,而常山中生物碱提取工艺和分离方法的报道较少,并且在常山的药理作用的研究中,关于常山中生物碱对畜禽生产常见的球虫病的研究未见报道.因此,本文由此出发,对常山中生物碱开发为新型兽药的几个关键的步骤进行了一些研究,包括生物碱的提取、分离及其抗球虫活性的研究,以期为常山的工业化生产和进一步开发利用提供理论依据.主要结果如下:1常山碱含量测定方法的确定.利用常山碱在碱水条件下水解,产生邻氨基苯甲酸并将其与N-1-萘基-乙二胺盐酸盐溶液显色的原理,用紫外分光光度计比色法测定得出,常山碱提取物的总碱含量为0.327 %.2常山总生物碱提取工艺的研究.运用正交实验,分别以浸膏重量和常山碱含量作为评价指标,考察了超声波提取工艺的效果,运用SPSS 14.0软件对结果进行分析,得到优化的提取工艺如下:其提取条件为提取温度50℃,料液比1:5,提取时间1 h.3为了评价常山碱的安全性,对其进行了小白鼠的急性毒性试验.预试验初步确定用药剂量,正式试验取60只昆明种小白鼠,灌胃给药后,连续观察7天,记录小白鼠的急性毒性反应,并通过改良寇氏法计算常山碱对小白鼠的半数致死量(LD50)及LD50的95 %可信限.结果表明,给药组部分小白鼠出现中毒反应并死亡,剖检主要脏器未见病理改变,测得LD50为18.16 g/kg体重,LD50的95 %可信限为15.35 g/kg~21.49 g/kg体重.实验结果初步提示,常山碱的毒性很低,临床用药安全可靠.4在常山总生物碱抗鸡球虫病和预防鸡球虫试验中,用艾美耳球虫接种雏鸡人工引发鸡球虫病.通过不同剂量常山总生物碱防治鸡球虫病作比较,确定鸡球虫病最佳临床治疗和预防剂量,其中以20 mg/kg给药可以达到良好的治疗鸡球虫病效果,其抗球虫指数(ACI为166.31).
- 作者：
- 雷宏东
- 学位授予单位：
- 甘肃农业大学
- 专业名称：
- 基础兽医学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2011年
- 导师姓名：
- 梁剑平
- 中图分类号：
- S853.7
- 关键词：
- 常山；常山碱；提取；分离；鸡；柔嫩艾美耳球虫；抗球虫活性
- Radix Dichroae；Dichrone；Extraction；Abstraction；Chicken；E. tenella；Anticoccdidal activity
- 基金项目：
- "十一五"国家科技支撑计划