三七总皂苷Rb1对肿瘤耐药逆转作用的实验研究
PNS-Rb1 Reverse Effect on Tumor Multidrug Resistance in Vivo Study
目的:肿瘤多药耐药(multidrug resistance, MDR)是目前导致肿瘤化疗失败的重要原因,寻找合适的耐药逆转剂已成为肿瘤药物学研究的关键性问题.三七总皂苷Rb1 (PNS-Rb1)是中药三七的主要活性成分,具有多靶点、高效、低毒的肿瘤耐药逆转作用,其临床应用潜力大,值得深入研究与开发.本实验拟针对P-gp介导的多药耐药现象,建立MFC/5-Fu小鼠前胃癌耐药细胞株及耐药肿瘤模型,探讨体内实验中PNS-Rb1对其的耐药逆转作用及机制,为PNS-Rb1作为耐药逆转剂应用于临床提供实验依据.方法:采用浓度梯度诱导法建立能够稳定生长和传代的MFC/5-Fu耐药细胞株,并进一步采用皮下接种法建立稳定的MFC/5-Fu耐药肿瘤模型,随机分组后用不同浓度的PNS-Rb1与5-FU或DDP联合治疗,比较小鼠体重变化、肿瘤、肝脏重量和肿瘤转移的情况,计算抑瘤率,并用流式细胞仪和免疫组化方法检测MDR1/P-gp、MRP1、Ki-67和VEGF的表达水平.结果:1.采用药物浓度递增法最终获得能在4.5μg/ml的5-Fu含药培养液中稳定生长MFC/5-Fu小鼠前胃癌耐药细胞株;2.采用皮下接种法成功建立稳定的MFC/5-Fu耐药肿瘤模型;3.流式细胞仪和免疫组化检测结果显示,与MFC相比较,MFC/5-Fu耐药肿瘤的P-gp表达明显增高(P0.05):4.经PNS-Rb1随机分组治疗后MFC与MFC/5-Fu组小鼠体重、肿瘤、肝脏重量及抑瘤率差异无统计学意义(P>0.05);5.免疫组化检测结果显示VEGF和Ki-67的表达在各治疗组间差异无统计学意义(P>0.05);6.经PNS-Rb1治疗后流式细胞仪和免疫组化检测结果显示,无细胞毒浓度的PNS-Rb1 (50mg/kg、100mg/kg)联合5-Fu或DDP组与空白对照组或单纯5-Fu化疗药物组相比较,P-gp表达明显下降(P0.05).结论:1.MFC/5-Fu耐药细胞株与耐药肿瘤模型均表现为典型的多药耐药表型,其耐药的主要机制是细胞内P-gp过表达;2.PNS-Rb1对MFC/5-Fu耐药肿瘤细胞的增殖及血管形成无明显影响;3.高浓度的PNS-Rb1 (100mg/kg)具有一定的抗肿瘤作用;4.无细胞毒浓度的PNS-Rb1 (50mg/kg、100mg/kg)可以下调MFC/5-Fu耐药肿瘤的P-gp表达,能够部分逆转MFC/5-Fu耐药肿瘤的多药耐药性,PNS-Rb1逆转肿瘤耐药作用明显优于维拉帕米;5. PNS-Rb1是一种有效安全的多药耐药逆转剂,具有较为广阔的应用前景.
- 作者：
- 王婷
- 学位授予单位：
- 昆明医学院
- 专业名称：
- 病理学与病理生理学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2011年
- 导师姓名：
- 申丽娟；杨策尧；钱忠义；贾伟
- 中图分类号：
- R285.5
- 关键词：
- 三七总皂苷Rb1；肿瘤多药耐药；耐药逆转剂
- Panax notoginseng saponins Rb1/PNS-Rb1；Multidrug resistance/MDR；Reverse agents