新疆小花棘豆中苦马豆素提取方法研究
Studies on the Technics of Extracting Swainsonine from Oxytropis Glabra DC in Xingjiang
小花棘豆(Oxytropis glabra DC)为豆科棘豆属植物,苦马豆素是其主要毒性成分之一,对动物小花棘豆中毒病的防治有重要意义.小花棘豆中苦马豆素的传统提取方法大多应用索氏提取法或者溶剂冷浸法处理草粉,依次经酸化、碱化萃取和硅胶柱层析等逐步纯化,最后对纯化物进行高温减压油浴升华.其步骤繁琐,周期长,消耗大量有机溶剂.提取效率低,需要改进.本研究通过系统预试验确定所含主要成分种类、小白鼠毒理实验确定有毒成分所在的溶剂部位、比较了3种(乙醇浸提-有机溶剂萃取法、乙醇浸提-柱层析分离法、超声波提取法)提取方法的提取效率、通过190-800 nm全波长扫描测定小花棘豆总生物碱的特征吸收波长、三因素三水平正交设计实验确定最佳提取工艺、研究小花棘豆总生物碱的抑菌能力、对提取得到的苦马豆素进行结构鉴定、检测小花棘豆不同部位中苦马豆素的含量.结果显示:小花棘豆样品中除了生物碱外,还含有黄酮、蛋白质、碳水化合物、脂肪、有机酸、氨基酸、皂甙等物质;毒性成分主要集中在氯仿部分和正丁醇部分,中毒小白鼠表现为心跳呼吸加速、流泪、四肢无力、嗜睡等症状;超声波提取法提取时间短、效率高,但杂质较多,乙醇浸提-有机溶剂萃取法消耗大量溶剂,提取效率低;乙醇浸提-柱层析分离法比较适合实验室的提取研究工作;小花棘豆总生物碱含量的特征波长为210 nm;测量总生物碱的方差分析确定最佳提取工艺为:提取温度为30℃下用75%的食用乙醇按15倍浸提.小花棘豆总生物碱对枯草芽孢杆菌,乳房链球菌有较强的抑菌作用,对两种菌的MIC为62.5mg/mL;对金黄色葡萄球菌,化脓链球菌的抑菌作用较弱,MIC为125mg/mL;对大肠杆菌,普通变形杆菌,面包酵母无抑菌作用.经TLC、MP、IR、MS鉴定,提取所得白色结晶为苦马豆素,对升华苦马豆素所得副产物做GC-MS分析,鉴定出7种化合物;用甲基-α-D-吡喃甘露糖苷(me-Gal)为内标,以SW进样质量浓度Y对SW和me-Gal峰面积比值X进行回归分析,得回归方程:Y=0.1886X-0.0312,相关系数R2=0.9998,表明SW进样质量浓度(0.047~6 mg/mL)对SW和me-Gal峰面积比值线性关系良好;小花棘豆中各部位苦马豆素含量为:种子(53±2.31 mg/kg);叶(22±0.07 mg/kg);全株(19±0.14 mg/kg);茎(11±0.34 mg/kg);苦马豆素纯度为95.14±1.27%.
- 作者：
- 王帅
- 学位授予单位：
- 塔里木大学
- 专业名称：
- 动物营养与饲料科学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2010年
- 导师姓名：
- 马春晖；胡建军
- 中图分类号：
- R284.1
- 关键词：
- 小花棘豆；苦马豆素；提取工艺
- Oxytropis glabra DC；Swainsonine；Extracting technique