磁靶向纳米药物载体的制备工艺方法学研究及在免疫分析中的初步应用
目的：
研制通用型用于放免分析的纳米级磁性固相分离载体以及构建具有肿瘤靶向特异性的188Re标记的磁-生物双靶向载药系统，探索其作为肿瘤导向治疗及磁靶向治疗双重治疗药物的可行性。
方法：
[1]采用化学共沉淀法合成Fe3O4磁性纳米微粒及水相/油相磁流体，考察了不同的分散剂对其稳定性的影响。
[2]对所制备的磁性纳米微粒进行了表面修饰，使其具有不同的功能团，将针对肝癌基因表达单抗Hepama-1与磁性纳米微粒进行连接，构建免疫磁性纳米微粒。
[3]采用直接标记法将188Re标记到Hepama-1及免疫磁性纳米微粒上并对其标记条件进行优化，对其标记原理进行了探索；采用羰基铼标记法，以fac-[188Re(CO)3(H2O)3]+作为放射性标记前体，二(2-吡啶甲基)-氨基]-乙酸(PADA)为螯合剂对Hepama-1及免疫磁性纳米微粒进行标记；并测定其质量控制指标。
[4]应用MTT法测定188Re标记的免疫磁性纳米微粒以及188Re-Hepama-1体外杀伤肝癌细胞株SMMC-7721的作用。
[5]以氨基硅烷化磁性纳米微粒为核心化学偶联羊抗兔/驴抗兔血清/羊抗人IgG，对其活化方式及偶联效率进行了研究。
[6]所制备的磁颗粒固相二抗作为磁分离载体，对几种放免及免放药盒中的分离试剂进行了替代和对比。
结果：
化学共沉淀法制得的Fe3O4平均粒径约为10～20nm，选用月桂酸作为分散剂，能使水相/油相磁流体保持较好的稳定性。磁性纳米微粒通过化学偶联二抗后作为磁性分离剂其各项指标达到了国外同类产品的技术要求，可用于放免分析。188Re对Hepama-1、(免疫)磁性纳米微粒的标记率均大于80％，在小牛血清中具有良好的体外稳定性，并且单抗保持较高的免疫活性。体外细胞毒性结果提示，Fe3O4纳米颗粒进入细胞后位于细胞质的溶酶体及吞噬泡内，未见进入细胞核；188Re标记免疫磁性纳米微粒能有效杀伤肝癌细胞株SMMC-7721，且呈剂量依赖性。
结论：
以月桂酸为分散剂，通过化学共沉淀法制备的四氧化三铁磁流体分散性较好，磁流体制备合成工艺得到了完善。羊抗兔IgG可通过化学偶联的方法固定在磁性纳米微粒上，188Re标记Hepama-1及免疫磁性纳米微粒对肝癌基因高表达的肿瘤具有良好的靶向结合性及杀伤作用。
- 作者：
- 梁胜
- 学位授予单位：
- 中国科学院上海应用物理研究所
- 专业名称：
- 无机化学
- 授予学位：
- 博士
- 学位年度：
- 2007年
- 导师姓名：
- 汪勇先
- 中图分类号：
- R979.1；TB383
- 关键词：
- 磁性纳米
-