小反刍兽疫病毒N蛋白抗原表位多肽的合成及竞争ELISA方法的建立
本文对小反刍兽疫病毒N蛋白抗原表位多肽的合成及竞争ELISA方法的建立进行了探讨。本研究根据生物信息学技术原理，应用计算机软件对小反刍兽疫(PPR)病毒的N蛋白的理化性质、二级结构的特性以及蛋白抗原性进行综合分析，并预测出N蛋白的9段可能抗原表位。通过PS3型多肽合成仪，采用Fmoc固相合成原理对其中3条抗原性较强的抗原表位进行化学合成。通过间接ELISA法进行了鉴定，合成的3条抗原表位多肽(Pep1、Pep2和Pep3)都能够和小反刍兽疫的阳性动物血清反应，且其中的Pep2多肽能够区分PPR和RP的阳性血清，是PPR病毒N蛋白的特异性抗原表位。将Pep2多肽偶联到BSA蛋白载体上，作为PPR竞争ELISA的包被抗原，以4F11单克隆细胞分泌的单抗作为竞争单抗，建立了PPR竞争ELISA方法。应用建立的竞争ELISA方法对381份血清样品进行检测，结果表明所建立的竞争ELISA方法和OIE的标准竞争ELISA试剂盒的总符合率为96.85％。
- 作者：
- 印春生
- 学位授予单位：
- 中国兽医药品监察所
- 专业名称：
- 预防兽医学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2007年
- 导师姓名：
- 支海兵
- 中图分类号：
- S855.3；S852.43
- 关键词：
- 小反刍兽疫；家畜免疫；蛋白抗原；抗原表位
- Peste des Petits；N protein；Peptide Synthesize；McAb Preparing；cELIESA