产气荚膜梭菌的多重PCR定型及α、β和ε毒素基因的克隆、表达和抗血清的制备
本文对产气荚膜梭菌的多重PCR定型及α、β和ε毒素基因的克隆、表达和抗血清的制备进行了探讨。本研究根据已发表的产气荚膜梭菌α，β和ε毒素的全基因序列，设计了分别针对α，β和ε毒素基因完整成熟肽序列的引物，用PCR扩增出了三种毒素的全基因序列的片段，其大小分别为1125bp、942bp和918bp。应用基因克隆和重组技术，成功的构建了含有α，β和ε毒素完整成熟肽基因的表达载体，分别命名为α-pET28a、β-pET32a和ε-pET28a，经PCR、双酶切鉴定和测序鉴定，目的基因的已正确的插入到表达载体中，且目的基因的序列和阅读框架完全正确。分别用重组α、β和ε毒素蛋白免疫家兔，制备了其特异性血清，并用毒素抗毒素中和试验测定了其中和效价。
- 作者：
- 田冬青
- 学位授予单位：
- 中国兽医药品监察所
- 专业名称：
- 预防兽医学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2007年
- 导师姓名：
- 蒋玉文
- 中图分类号：
- S852.61；Q786
- 关键词：
- 畜禽免疫；荚膜梭菌；基因表达
- Clostridium perfringens；Typing；Multiplex PCR；Clone；Express