9例水痘带状疱疹病毒的分离鉴定与生物学特性
水痘一带状疱疹病毒(VZV)，属a一疱疹病毒亚科，人疱疹病毒3型。其原发感染为水痘，潜伏再度激活则引起带状疱疹。VZV自然感染人体后，大多数表现出终身免疫，也有极少数人会再次感染。以前患过水痘的个体，当受到免疫抑制后会表现出典型带状疱疹。近年来，带状疱疹(HZ)发病率有明显增高的趋势，且引起的后遗神经痛(PHN)用抗病毒药物治疗无明显疗效。这两种疾病及其相关后遗症已逐渐成为重要的公共卫生问题而日益受到重视。在疫苗方面，水痘减毒活疫苗是唯一获准用于预防由人类疱疹病毒引起的疾病的疫苗。虽然，疫苗的免疫效果得到了肯定，但在水痘疫苗接种工作中还存在一些值得进一步研究和完善的问题。本课题主要通过细胞培养的方法把水痘疱疹病毒进行分离和培养并且进行鉴定，得到的病毒样本可以用于水痘一带状疱疹疫苗的研究，也可以为今后西北地区水痘一带状疱疹发病及预防奠定一定基础。 水痘一带状疱疹病毒早在1954年分离成功，但由于其高度的种属特异性，其自然感染仅仅发生于人与大猩猩，使其研究缓慢。目前用体外培养(例如vero细胞)来分离病毒的方法是比较成熟的，把收集到的病人新鲜疱疹内液体接种于活细胞中进行传代，不断扩增病毒，最后得到适应细胞培养的病毒。本研究从临床患者采集了疱疹液和急性期、恢复期血清，用Vero细胞培养从从9例水痘及带状疱疹病人水痘液中分离到2侏病毒。2株病毒均具有使感染细胞园缩、融合、脱落等典型的VZV局灶性细胞病变(CPE)特点，CPE随着传代次数增加而加快。用特异性抗VZV抗体对分离株做了间接免疫荧光测定，可见典型的感染细胞核内荧光块。2株病毒感染细胞制成的Ag片，检测4例带状疱疹病人急性期及恢复期血清，荧光抗体均有4倍以上增高。-20℃保存一个月的毒种感染Vero细胞，连续3次传代未见细胞出现CPE。试验结果表明，用体外培养方法可以从临床患者疱液中一定几率分离出水痘一带状疱疹病毒，此病毒对Vero细胞是比较敏感的。本实验分离到的2株VZV经特异性血清抗体测定确属患者致病的病原体。分离得到的VZV在体外的生物学性质不稳定，-20℃不能长期保存。7例标本未分离到病毒主要原因是所取水疱液量太少，且病人用过干扰素、病毒唑、阿昔洛韦等抗病毒药物。
- 作者：
- 李清
- 学位授予单位：
- 昆明医学院
- 专业名称：
- 生物化学和分子生物学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2007年
- 导师姓名：
- 孙茂盛
- 中图分类号：
- R752.12；R373
- 关键词：
- 水痘带状疱疹病毒；细胞培养；分离鉴定；生物学特性
- Varicella-pox herpes virus；cell cultivation；separation；appraisal；Biology characteristic property