蝴蝶兰、文心兰再生体系的建立及遗传转化体系的初步研究
Preliminary Studies on Regeneration and Transformations Systems of Phalaenopsis and Oncidium
本试验主要以蝴蝶兰、文心兰作为材料，建立了蝴蝶兰、文心兰的高频再生体系，并在此基础上进行了农杆菌介导的GUS基因的转化，利用共培养后组织化学染色法分析探讨了影响转化效率的各种因素，初步优化了遗传转化体系。主要结果如下： 1．蝴蝶兰幼嫩花梗原球茎状体诱导率较高，培养基MS+6-BA 5.0mg/L+NAA 0.5 mg/L诱导率最高，达100％；原球茎增殖的最佳培养基MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+TDZ 0.2 mg/L，增殖系数达2.3；原球茎块在培养瓶内有群体优势效应，切块3.0 mm时增殖系数最大；添加6-BA和NAA的1/2 MS有利于生根，平均根数达到3.2条；室内炼苗3 d+室外炼苗3 d有利于移栽，移栽成活率达90.0％。 2．以文心兰花梗为材料，在NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+TDZ 0.3mg/L的培养基上，愈伤组织诱导率最高，可达78％，诱导率受[NAA]/[6-BA]的浓度比和光照强度的影响；在6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L的激素组合下，从愈伤组织分化出幼苗的形成率和商品化率可达到最佳效果；中、低无机盐浓度且全量的基本培养基较利于幼苗分化；当分化形成的幼苗株高为1-2 cm时，可进一步壮苗生根，生根苗在适宜条件下移栽，成活率可达99％以上。 3．以蝴蝶兰原球茎为外植体进行农杆菌介导，优化的转化条件为预培养时间3d，菌液侵染浓度OD<,600>=0.3，菌液侵染时间10 min，pH值=5.4，侵染后，与农杆菌共培养5 d并添加100 μmol/L AS，瞬间表达率最高。 4．将适宜蝴蝶兰遗传转化的条件运用于文心兰，仅能得到较低的转化率。
- 作者：
- 满若君
- 学位授予单位：
- 广西大学
- 专业名称：
- 作物栽培学与耕作学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2007年
- 导师姓名：
- 杨丽涛；李杨瑞
- 中图分类号：
- S682.3；S336
- 关键词：
- 蝴蝶兰；文心兰；再生体系；组织培养；农杆菌介导；遗传转化
- Phalaenopsis；Oncidium；Tissue culture；Agrobacterium tumefaciens mediated method；Transformation