犬抗细粒棘球绦虫保护性抗原EGM9重组蛋白引起免疫应答变化规律的研究
包虫病是由棘球属中绦期引起的重要人畜共患寄生虫病,呈世界范围流行,导致了全球性的公共卫生和经济问题。犬是包虫病最主要的终末宿主,在传播包虫病的过程中起关键作用,所以对终末宿主一家、牧犬防治是控制包虫病流行的关键,若能对终末宿主实施疫苗预防,就可直接阻止虫卵的传播,控制传染原,保护中间宿主避免感染包虫病。因此在切断包虫病循环链过程中,通过对犬进行免疫预防是完全有效的途径。 Zhang等利用mRNA的差异显示法(DDRT-PCR)检测细粒棘球绦虫成熟虫体与非成熟虫体蛋白基因表达差异,筛选出了成熟虫体的特异性基因片段即EgM家族片段,在大肠杆菌中高效表达其中的EgM9重组蛋白,并纯化。 本实验针对EgM9重组蛋白辅以佐剂QuilA免疫犬后,用ELISA的方法检测抗体和Real-Time PCR的方法检测细胞因子。 ELISA检测到抗体水平明显升高,而且其主要抗体IgG及其亚类在免疫组和对照组之间存在明显的差异,Real-Time PCR检测到细胞因子表达水平IFN吖是0周的1000倍以上,IL-4也有近20倍的增加。此实验结果表明,EgM9重组蛋白免疫犬后Thl和Th2明显上升,能激起机体很强的体液和细胞免疫。 在原头节攻击实验犬45天后,剖检实验犬发现,免疫组平均荷虫数为7573条,只占到感染原头节总数(转化率)的3.79﹪,成熟的脱落孕节有3060条,只占到感染原头节总数的1.5﹪;而对照组平均荷虫数达到57080条,达到感染原头节总数的28.5﹪,并且成熟的脱落孕节有21900条,达到感染原头节总数的11.0﹪。相对于对照组,免疫组的保护率(减虫率)达到86﹪,证明EgM9蛋白免疫犬后能取得明显的免疫保护效果。
- 作者:
- 郭宝平
- 学位授予单位:
- 新疆农业大学
- 专业名称:
- 预防兽医学
- 授予学位:
- 硕士
- 学位年度:
- 2007年
- 导师姓名:
- 岳城;王进成
- 中图分类号:
- S852.734
- 关键词:
- 包虫病;细粒棘球绦虫;EGM9重组蛋白;抗体;细胞因子
- Hydatid disease;Echinococcus granulosus;EgM9 recombinant protein;Antibody;Cytokine