蛋白酶体抑制剂乳孢素对肠缺血再灌注肝损伤保护作用的研究
目的：小肠缺血再灌注(intestine ischemia reperfusion，IIR)除发生于肠道及其系膜血管自身疾病外，还可继发于多种临床疾病的病理生理过程中，引起全身系统性损伤，而肝脏则是缺血再灌注的最直接器官。本课题旨在研究IIR后肝损伤机制及蛋白酶体抑制剂乳孢素对IIR．肝损伤的保护作用，并在分子水平为乳孢素的临床应用提供实验依据。 方法：将32只健康雄性Wistar大鼠随机分为4组：(1)假手术组(阴性对照组)：(2)肠缺血再灌注组(I/R组)：(3)低剂量乳孢素预处理组(0.2mg/kg)；(4)高剂量乳孢素预处理组(0.6mg/kg)。I/R．组及乳孢素预处理组用无创小血管夹夹闭肠系膜上的动脉(superior mesentericartery，SMA)1h，再灌注4h，建立肠缺血再灌注损伤模型；乳孢素预处理组术前1h腹腔内注射乳孢素：阴性对照组仅进行剖腹术及SMA分离术。再灌注结束，取血，肝和肠组织。检测：(1)肝、肠损伤指标：肝ALT、AST和LDH水平的测定，光镜下观察小肠和肝组织学改变；(2)20s蛋白酶体活性；(3)中性粒细胞激活相关指标：肝组织髓过氧化酶(myeloperoxidase，MPO)活力及细胞间黏附分子-1(intercellular adhesionmdecule，ICAM-1)表达情况；(4)肝组织NF-кB的表达。 结果：1、与假手术组相比，I/R．组：(1)组织形态学见肝组织有明显病理损伤，表现为肝组织水肿、出血和炎性粒细胞浸润。(2)肝功血清酶学检测：AST、ALT和LDH均显著升高(p<0.05，p<0.01，p<0.05)；提示肝功能严重受损。(3)肝组织MPO水平显著升高(p<0.05)；20S蛋白酶体活性无明显变化(p>0.05)。(4)免疫组织化学检测：肝组织ICAM-1和NF-кB表达均显著增强。2、采用乳孢素预处理后，与I/R组相比，0.6mg/kg乳孢素预处理组：(1)组织形态学见肝、肠损伤程度明显减轻。(2)肝功能改善，表现为血清AST、ALT和LDH水平显著降低(p<0.05，p<0.05，p<0.05)。(3)肝、肠组织过氧化损伤及白细胞浸润减轻，表现为肝脏MPO含量减少(p<0.05)；20S蛋白酶体活性降低(p<0.01)。(4)肝组织中ICAM-1和NF-кB表达减弱。结论：(1)小肠缺血再灌注可以导致严重的肝损伤；(2)肠缺血再灌注肝损伤机制复杂，其发生和发展与NF-кB激活有关；(3)乳孢素预处理对肠缺血再灌注导致的肝损伤有明显的保护作用，且呈剂量依赖性；(4)蛋白酶体抑制剂乳孢素通过抑制20S蛋白酶体、NF-кB的活性，抑制ICAM-1表达和中性粒细胞浸润。
- 作者：
- 陈华
- 学位授予单位：
- 大连医科大学
- 专业名称：
- 药理学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2007年
- 导师姓名：
- 姚继红
- 中图分类号：
- R574.5；R963
- 关键词：
- 蛋白酶体；乳孢素；肝损伤；肠缺血再灌注
- proteasome；Lactacystin；liverinjury；intestinal ischemia/reperfusion