水通道蛋白1在重症急性胰腺炎时肺组织的表达及清胰汤干预的实验研究
背景：重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP) 发病凶险，并发症多，死亡率高，其发病机制未完全明了，可引起胰腺局部和全身炎症反应。常可累及胰腺外器官，如肺脏、肾脏、等。研究表明，75﹪的重症急性胰腺炎病死患者与急性呼吸窘迫综合症(ARDS)有关<''[1]>。而ARDS是急性肺损伤的一个终末结局<''[2]>，也是重症急性胰腺炎病人早期死亡的主要原因。早期减轻肺损伤对于降低SAP的死亡率有重要意义。水通道蛋白(Aquaporin)是近年来发现的一种蛋白，分布于肺中的主要有1、4、5。它们主要分布在肺血管和肺泡上皮<''[3，4]>。它们在肺水液体代谢中起重要作用。 目的：本试验观察水通道蛋白1(Aquaporinl，AQP1)在SAP肺损伤大鼠肺组织中的表达，从新的角度探讨肺损伤发生的机制。并观察清胰汤对SAP大鼠肺脏AQP1表达的影响。 方法：健康Wistar大鼠120只，体重220-280克，雌雄不拘，随机分为4组(SAP组、假手术组、地塞米松治疗组、清胰汤治疗组)，每组30只。SAP组和药物干预组开腹后用无损伤动脉夹夹闭胰胆管入肝门处，逆行胰胆管缓慢注入1.5﹪的熊去氧胆酸钠溶液(1ml/kg)，取出动脉夹关腹，建立SAP肺损伤模型。清胰汤干预组造模后胃管注入中药煎液(10ml/kg)。地塞米松干预组于造模后股静脉注入地塞米松(1ml/kg)。假手术组常规剖腹后翻动胰腺，关腹。各组又分为6小时、12小时、24小时组，分别与造模后6小时、12小时、24小时处死，取肺组织及动静脉血。检测血清淀粉酶水平(AMY)、测定动脉血气PO<,2>、PCO<,2>。取肺脏计算肺湿干重比值(W/D)、大体及镜下观察肺脏病理学改变，并用免疫组化和RT-PCR方法测定肺脏水通道蛋白1的表达情况。 结果：(1)SAP各组与同时相点假手术组相比，血清AMY水平明显升高(P<0.01)；动脉血PO<,2>明显下降，PCO<,2>明显升高(P<0.01)；肿W/D值增高明显(P<0.01)；肺组织出现水肿、充血、中性粒细胞浸润、灶性肺不张等改变，并随时限延长而加重。地塞米松组与同时相点SAP组相比，肺组织病理改变明显减轻；血清AMY、动脉血PCO<,2>明显下降(P<0.0 1)，PO<,2>明显升高(P<0.01)。清胰汤组与同时相点SAP各组相比肺组织病理改变明显减轻，血清AMY、动脉血PCO<,2>明显下降(P<0.01)，动脉血PO<,2>明显升高(P<0.01)。清胰汤组与同时相点地塞米松组相比，肺W/D值明显降低(P<0.05)，血清AMY水平明显降低(P<0.05)，动脉血PO<,2>明显升高，PCO<,2>明显降低(P<0.05)。 (2)免疫组化结果：较之假手术组，SAP各时限组AQP1表达下降(P<0.01)24小时组AQPl表达有回升(P<0.01)；地塞米松干预组与SAP组相比，AQP l的表达量有显著升高(P<0.01)；清胰汤组与SAP组相比AOP 1的表达量有显著升高(P<0.01)；各时相点两药物干预组间AQP 1表达无显著差异(P>0.05)。 (3)RT-PCR结果：与假手术组相比SAP各时相组AQP1 mRNA 表达量下降(P<0.01)，24小时组AQP 1表达有回升(P<0.01)；地塞米松组与SAP组相比，AQP1 mRNA的表达量有显著升高(P<0.01)；清胰汤组与SAP模型组相比AQP 1 mRNA的表达量有显著升高(P<0.01)；两药物干预组各时相点之AQPl mRNA的表达无显著差异(P>0.05)。 结论：(1)应用1.5﹪熊去氧胆酸钠逆行胰胆管内注射，大鼠模型的肺脏组织经病理学检查，具有明确的肺脏水肿、充血、炎细胞浸润、灶性肺不张等改变，肺湿干重比值明显增加。说明该方法制备sAP合并肺损伤模型是成功的。 (2)SAP肺损伤时肺脏AQP 1表达降低，说明AQP1在肺脏的水液代谢中起重要作用。在SAP肺损伤中是一种保护性蛋白。 (3) 应用清胰汤后AQP1的表达上升。说明清胰汤在治疗SAP肺损伤时起到了通过某种途径起到了调节了肺脏AQPl表达的作用。
- 作者：
- 刘晓东
- 学位授予单位：
- 大连医科大学
- 专业名称：
- 中西医结合临床
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2007年
- 导师姓名：
- 陈海龙
- 中图分类号：
- R965；R576
- 关键词：
- 重症急性胰腺炎；肺损伤；水通道蛋白1；清胰汤；地塞米松
- Severe Acute Pancreatitis；Lung injury；Aquaporin1；QingYiTang；Hexadecadrol