慢肾1号方对系膜增生性肾炎小鼠α-SMA、TGF-β1影响的实验研究
The Experimental Study of Man Shen No1 Prescription on α-SMA and TGF-β1 in Mesangial Proliferative Glomerulonephritis Rats
目的：本文通过建立改良的慢性血清病系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)动物模型，应用慢肾1号方对该模型进行干预性治疗，通过观察MsPGN小鼠模型尿蛋白、血清肾功能指标、肾脏病理形态学以及肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的变化，进一步明确慢肾1号方对系膜增生性肾小球肾炎的治疗作用，并探讨其治疗系膜增生性肾小球肾炎的可能作用机理，为慢肾1号方更好的应用于临床提供相关理论依据。 方法：昆明种小鼠40只，采用双后足垫皮下注射完全弗氏试剂(CFA)的方法进行预免疫后，腹腔注射牛血清白蛋白(BSA)并尾静脉注射大肠杆菌内毒素(LPS)进行免疫，复制系膜增生性肾小球肾炎小鼠模型。造膜后，选取24小时尿蛋白总量及血肌酐、尿素氮明显升高(均较造模前出现显著性差异)的小鼠20只，随机分为模型组、慢肾1号方组，每组10只，并以正常昆明种小鼠10只为正常组。各组小鼠每天灌胃给药一次，连续4周。治疗组喂以慢肾1号方0.5ml/只，正常组和模型组均喂以生理盐水0.5ml/只。治疗后用考马斯亮蓝法测定各组小鼠尿蛋白含量，分别用苦味酸除蛋白法和二乙酰—肟法测定各组小鼠血肌酐和尿素氮的含量，在光镜下观察各组小鼠肾组织病理学改变情况，采用免疫组织化学法检测各组小鼠肾组织中α-SMA、TGF-β1的表达情况，并用病理图象分析系统对免疫组化染色结果进行半定量分析。 结果：24小时尿蛋白含量测定：模型组和慢肾1号方组均出现蛋白尿。与J下常组相比，模型组小鼠24小时尿蛋白显著升高(P<0.01)，慢肾1号方组24小时尿蛋白含量与模型组比较明显降低(P<0.0 1)，且与正常组无显著差异。肾功能检测结果：模型组小鼠尿素氮(BUN)、血肌酐(cr)与正常组相比显著升高(P<0.0 1)。慢肾1号方组与模型组相比BUN、Cr均明显降低(P<0.01)。肾组织光镜学观察：慢肾1号方组与模型组相比肾小球系膜区的宽度明显减小，系膜细胞增生和系膜基质积聚等超微结构病变明显减轻。肾组织中α-SMA表达的免疫组化结果：模型组肾小球系膜区内可见大量α-SMA阳性表达，尤其以肾小球血管极多见，慢肾1号方组α-SMA在肾小球的表达较模型组有明显减少。半定量分析显示，与正常组相比，模型组的肾小球α-SMA相对含量显著增高(P<0.01)。与模型组相比，慢肾1号方组的肾小球α-SMA相对含量显著降低(P<0.01)。肾组织中TOF-β1表达的免疫组化结果：模型组可以见到TGF-β1大量表达在毛细血管袢及系膜区，同时在肾间质的表达亦明显增多。慢肾1号方组TGF-β1在肾小球的表达与模型组相比明显减少。半定量分析显示，正常组相比，模型组的肾小球TGF-β1相对含量显著增加(P<0.01)。与模型组相比，慢肾1号方组的肾小球TGF-β1相对含量显著降低(P<0.01)。结论：1、慢肾1号方能够显著减少MsPGN小鼠尿蛋白，降低血肌酐和尿素氮，促进肾小球病理损害的修复。进一步证实了其保护肾功能的作用。2、慢肾1号方可以抑制MsPGN小鼠肾组织α-SMA的表达，具有抑制肾小球系膜细胞的增殖的作用。3、慢肾1号方可以抑制MsPGN小鼠肾小球系膜区TGF-β1的表达，减轻系膜基质积聚，进而阻断肾小球疾病的进展，这可能是其治疗MsPGN的作用机理之一。
- 作者：
- 郑琳琳
- 学位授予单位：
- 大连医科大学
- 专业名称：
- 中西医结合临床
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2007年
- 导师姓名：
- 解建国
- 中图分类号：
- R692.3
- 关键词：
- 肾小球肾炎；慢肾1号方；α-平滑肌肌动蛋白；转化生长因子；尿素氮；系膜细胞
- Mesangial proliferative glomerulonephritis；Man Shen No1 Prescription；α-smooth muscle actin(α-SMA)；Transforming growth factorβl(TGF-β1)