槲皮素及其单糖苷异槲皮素,双糖苷芦丁抗自由基构效关系研究
目的:采用不同氧自由基损伤模型对槲皮素(Quercetin，Q)及其单糖苷异槲皮素(Isoquercetin，I)和双糖苷芦丁(Rutin，R)的抗自由基作用进行比较性研究，进而对其构效关系予以探讨。 方法1.Q，I，R体外清除氧自由基作用采用H2O2/Fe2+体系，通过Fenton反应生成羟自由基(·OH)；邻苯三酚自氧化法，产生超氧阴离子(O2·-)；通过上述Fenton反应生成·OH，进而造成小鼠肝匀浆细胞膜脂质过氧化以及红细胞(RBC)液中RBC损伤性破裂。根据UV-754分光光度计所测光密度数值计算三种黄酮类药物在四种不同浓度时的自由基清除率和抑制率，并根据清除率及抑制率计算各黄酮类化合物的SC50以及IC50。 2.Q，I，R对体外细胞自由基损伤模型的保护作用分别利用过氧化氢(H2O2)和缺氧缺糖培养液对人胚肾细胞(HEK293)造成损伤。采用MTT法，观察不同处理后细胞存活率变化，测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力及细胞培养液上清乳酸脱氢酶(LDH)含量，总抗氧化能力(TAC)，在细胞水平观察三种化合物的清除自由基作用。 3.Q，I，R对脑、肝自由基损伤模型的保护作用通过双侧颈总动脉结扎造成小鼠持久性脑缺血模型，应用CCl4腹腔注射造成小鼠肝脏自由基损伤模型。测定小鼠脑匀浆SOD活力以及丙二醛(MDA)含量以及各组小鼠平均存活时间以观察脑缺血对小鼠的损伤及三种化合物的保护作用。通过测定小鼠肝匀浆谷丙转氨酶(GPT)以及MDA含量，观察CCl4对小鼠肝脏的损害以及三种化合物的保护作用。 结论1.三种黄酮类化合物均有极强的抗自由基活性；在体外纯化学反应体系(·OH实验，O2·-实验)中，R＞I＞Q；体外生物体系(小鼠肝匀浆膜脂质过氧化损伤实验，兔RBC膜破裂实验)中，其顺序正好相反，为Q＞I＞R。 2.三种黄酮类化合物对体外细胞培养中H2O2及缺氧缺糖产生的自由基有显著清除作用，对损伤细胞具有保护作用。其作用强度为Q＞I＞R。 3.三种黄酮类化合物对脑缺血诱发小鼠脑自由基损伤以及CCl4诱发肝自由基损伤均有显著抑制作用，其作用强度为Q＞I＞R。 4.上述三种黄酮类化合物的体内外抗自由基作用与分子中C-3位糖基结构密切相关。在生物体系中随分子中糖基的增加，抗自由基作用依次减弱，但在非生物系统(纯化学反应系统)中，其规律正相反。
- 作者：
- 金越
- 学位授予单位：
- 大连医科大学
- 专业名称：
- 药理学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2006年
- 导师姓名：
- 韩国柱
- 中图分类号：
- R969.4
- 关键词：
- 槲皮素；异槲皮素；芦丁；自由基；构效关系
- quercetin；isoquercetin；rutin；free radical