细胞色素P450芳香化酶在大鼠多囊卵巢中的表达及其生物学意义
目的研究细胞色素P450芳香化酶在大鼠多囊卵巢颗粒细胞中的表达水平，探讨细胞色素P450芳香化酶与多囊卵巢综合征发生、发展的关系，为进一步阐明PCOS的发病机制提供理论依据。方法采用孕激素联合HCG法建立多囊卵巢综合征大鼠模型。(1)运用化学发光免疫方法测定大鼠血清中睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)的含量；(2)运用T/A克隆将RT-PCR扩增片段连接载体，并进行测序分析。(3)应用半定量RT-PCR检测PCOS组及正常组大鼠卵巢组织中细胞色素P450芳香化酶基因(CYP19)的表达水平；(4)采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法对大鼠卵巢组织中细胞色素P450芳香化酶进行检测；结果(1)PCOS组血清中T、FSH含量较正常组升高；(2)RT-PCR扩增产物经测序分析，结果与GeneBank中CYP19cDNA序列比对，完全一致。(3)PCOS组和正常组卵巢组织中CYP19基因表达水平，经半定量分析，相对表达强度分别为(0.138±0.072)和(0.759±0.236)，差别有显著性意义(P＜0.01)；(4)免疫组化结果：模型组与正常组之间比较，原始卵泡、初级卵泡和成熟卵泡细胞色素P450芳香化酶蛋白表达下降(P＜0.05)。模型组各级卵泡间比较表达无显著性差异，在正常对照组内，初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡比较，芳香化酶蛋白表达有显著性差异(P＜0.05)结论细胞色素P450芳香化酶mRNA在PCOS大鼠卵巢组织中呈低表达；细胞色素P450芳香化酶蛋白在PCOS大鼠卵巢初级卵泡和成熟卵泡中表达下降；多囊卵巢综合征的发生可能与细胞色素P450芳香化酶在mRNA和蛋白水平的表达下调有关。
- 作者：
- 刘秀兰
- 学位授予单位：
- 内蒙古医学院
- 专业名称：
- 人体解剖与组织胚胎学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2006年
- 导师姓名：
- 闫晓红；博晓真
- 中图分类号：
- R711.75；R730.23；R-332
- 关键词：
- 多囊卵巢综合征；细胞色素P450芳香化酶；免疫组化方法；RT-PCR检测
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