与内皮素受体相互作用的细胞内信号分子的克隆
本研究设计了从人婴儿脑cDNA库筛选与ETAR和ETBR相互作用的新的蛋白分子；通过GSTpull-downassay和免疫共沉降实验探讨ETAR和ETBR与未知蛋白分子的相互作用。通过该研究可达到发现新的与ETAR和ETBR相互作用的蛋白分子，从而阐明其对下游信号调节的作用的目的。我们的研究分为两大部分。 第一部分为酵母杂交筛选。笔者用ETAR和ETBRC末端作为bait通过酵母杂交系统从人婴儿脑cDNA库筛选与其相互作用的分子。 第二部分研究了一种新的锌指蛋白(FLJ)与ETARC末端相互作用。为了证明一种新的锌指蛋白FLJ与ETAR的相互作用，GST融合的ETARC末端被用在了GSTpull-downassay中。结果表明FLJ结合ETAR-C-GST融合蛋白而不是单独的GST蛋白。 通过酵母杂交系统、GSTpull-downassay和免疫共沉降实验研究表明：一种新的锌指蛋白FLJ与ETAR碳末端存在相互作用。为阐明ETAR下游信号机制提供了新的线索。FLJ的功能和这种相互作用对于ETAR下游信号途径的效应还有待于进一步的探讨。
- 作者：
- 鲁凌云
- 学位授予单位：
- 大连医科大学
- 专业名称：
- 药理学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2005年
- 导师姓名：
- 林原
- 中图分类号：
- R972；R962
- 关键词：
- 酵母杂交筛选；内皮素受体；细胞内信号分子；免疫共沉降实验；ETAR碳末端；锌指蛋白FLJ；克隆
- Yeast two hybrid；ETAR and ETBR C-terminus；FLJ(full length of Japan)；co-immunoprecipitation；glutathione S-transferase pull-down assay