脾脏树突状细胞在MODS病程中迁移变化的研究
目的：观察小鼠脾脏树突状细胞(dendritic cell，DC)在多器官功能障碍综合征(Mul-tiple organs dysfunction syndrome，MODS)分布位置的变化，检测脾脏DC功能相关的表面分子和趋化因子受体-7在MODS病程中的变化规律与意义。探讨脾脏13(2在免疫紊乱、过度炎症反应及脏器损伤机制中的影响与作用，为MODS免疫学机制与防治研究提供新的依据。方法：腹腔注射酵母多糖复制C57BL/6小鼠MODS模型，实验分组：(1)正常对照组(n=15)；(2)MODS组(n=60)：3-6小时组、24-48小时组、5-7日组和10-12日组。分别在设定的时间点取血和脾脏。脾脏-部分无菌、无酶液氮冻存，另一部分用于做单细胞悬液。采用免疫组化方法观察各组小鼠脾脏DC CD11c表达情况；采用流式细胞术检测脾脏DC细胞免疫表型(MtHC-Ⅱ和CD86)、脾脏DC表达CCR7在MODS病程中的变化、脾脏DC；在MODS病程过程中数量变化、外周血T细胞亚群和外周血单核细胞MHC-Ⅱ分子表达水平；YUNEL，方法检测在MODS病程中脾脏细胞凋亡现象。结果：(1)CD11c阳性细胞在正常小鼠脾脏中主要分布在边缘区和滤泡生发中心，在白髓T细胞区和红髓中DC分布极少；致伤早期(3-6小时)，CD11c阳性细胞主要分布白髓的T细胞区；急性损伤期(12-48小时)，CDllc阳性细胞此时主要分布在脾脏白髓；缓解期(5-7天)，CD11c阳性细胞分布较为弥散；MODS期(10-12天)，CD11c阳性细胞又以脾脏边缘区附近分布为主。(2)脾脏DC的数量在致伤后3-6小时组急剧增加，24-48小时组明显下降，5-7天和10-12天组与正常小鼠脾脏DC数量相当。(3)在24-48小时组和10-12天组脾脏存在大量凋亡细胞(4)脾脏DC表达MHC-Ⅱ、CD86、CCR7在3-6小时和12-48小时显著增加，10-12天组MHC-Ⅱ、CD86、CCR7表达水平明显下降。(5)酵母多糖致伤后3-6小时组，外周血单核细胞MHC-Ⅱ分子和CD4+T细胞含量下降而CD8+T细胞含量增加，CD4+/CD8+比值降低；致伤后24-48小时组，外周血单核细胞MHC-Ⅱ分子和CD4+T细胞继续呈现下降趋势，降至最低点，CD8+T细胞含量也减少，CIM+/CD8+比值降低；致伤后5-7天组，外周血单核细胞MHC-Ⅱ分子有所恢复，CIM+T细胞增加，CD4+/CD8+比值回升，但仍低于正常组；致伤后10-12天组，外周血单核细胞MHC-Ⅱ分子和CD4+T细胞数目再度明显减少。而CD8+T细胞数目明显增高，CD4+/CD8+比值倒置，较正常组明显下降。结论：1、脾脏DC在MODS病程早期由脾脏边缘区向白髓发生迁移，并在迁移过程中不断快速成熟，导致了机体失控性炎症反应；晚期DC以不成熟状态滞留在边缘区附近，此时机体处于免疫抑制状态。2、CCR7可能是影响MODS小鼠脾脏树突状细胞迁移活性和免疫功能的一个重要因素。MODS病程中脾脏DC CCR7表达水平可以作为评估其迁移活性和小鼠机体细胞免疫应答水平的一个指标，CCR7表达水平的变化可能是MODS病程中免疫亢进和免疫抑制的关键环节。
- 作者：
- 侯国存
- 学位授予单位：
- 内蒙古医学院
- 专业名称：
- 病理学与病理生理学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2008年
- 导师姓名：
- 冀文茹
- 中图分类号：
- R657.6
- 关键词：
- 脾脏；树突状细胞；多器官功能障碍综合征；分布位置
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