AL68系列化合物(EGFR-TKIs)的抗肿瘤作用和机制研究
Investigation on the Antitumor Effects and Mechanisms of EGFR Tyrosine Kinase Inhibitors AL68 Series
目的:从17个AL68系列化合物(EGFR-TKIs)中筛选出具有显著抗肿瘤活性的化合物,并进一步评价其在体外的抗肿瘤作用,同时初步探讨其作用机制. 方法:(1)采用MTT法对AL68系列化合物进行初步筛选,观察它们在体外对人体肺腺癌A549细胞株和人体结肠癌LOVO细胞株的增殖抑制作用.(2)对体外筛选出的7个活性化合物,考察它们对裸鼠A431异种移植瘤模型的生长抑制作用.(3)对经体内外筛选获得的具有显著抗肿瘤活性的化合物AL6801和AL6802,采用MTT法继续评价其在体外对7个实体瘤细胞株的增殖抑制作用.(4)采用ELISA方法在分子水平检测AL68系列各活性化合物对EGFR酪氨酸激酶磷酸化的影响.(5)采用流式细胞仪检测AL6801和AL6802诱导肿瘤细胞凋亡的能力和对细胞周期的影响. 结果:(1)经过体外初步筛选,结果发现了7个具有较强体外抗肿瘤活性的化合物:AL6800,AL6801,AL6802,AL6815,AL6817,AL6818,AL6819.其中AL6801对A549显示了很强的增殖抑制作用;AL6802则对LOVO表现了很强的抑制能力.(2)体内抗肿瘤活性筛选结果显示:各活性化合物对A431移植瘤都表现了不同程度的生长抑制作用.其中AL6801,AL6802在50mg/kg时对A431移植瘤的抑瘤率分别为:63.09％,52.19％.同时在十天的给药过程中,与对照组相比,样品组荷瘤裸鼠的体重未见明显减轻,也没有出现其它明显毒性反应.(3)对AL6801和AL6802的体外进一步研究显示,两者作用72小时后对七个肿瘤细胞株表现出了不同程度的剂量依赖性抑制作用,这一结果提示肿瘤细胞EGFR表达水平可能无法预测对EGFR抑制剂的敏感性.同时,在AL6801,AL6802和ZD1839作用的低剂量组主要观察到其增殖活性受到剂量和时间依赖性抑制;而在高剂量组则可见明显的时间剂量依赖性细胞毒作用.(4)ELISA方法检测的结果表明:各活性化合物均对EGFR酪氨酸激酶的磷酸化具有不同程度的剂量依赖性抑制作用,其中AL6801的抑制能力最强,AL6802也显示了较好的抑制效果.(5)流式细胞仪检测结果表明:AL6801和AL6802都具有诱导人体肺腺癌A549细胞株凋亡的能力,并呈良好的时效关系,同时将其细胞周期阻滞于G0-G1期. 结论:经体内外筛选获得的AL6801和AL6802具有显著的抗肿瘤活性,它们在体外能剂
- 作者：
- 程红
- 学位授予单位：
- 上海医药工业研究院
- 专业名称：
- 肿瘤药理学
- 授予学位：
- 硕士
- 学位年度：
- 2006年
- 导师姓名：
- 陈秀华
- 中图分类号：
- R96
- 关键词：
- EGFR；抗肿瘤活性；EGFR酪氨酸激酶抑制作用；AL6801和AL6802
- EGFR；antitumor activity；inhibition of EGFR tyrosine kinases phosphorylation；AL6801 and AL6802